Citas bibligráficas
Gutiérrez, L., (2021). Diseño de tamizados genéticos en Saccharomyces cerevisiae usando una biblioteca genómica de plásmidos multicopia [Universidad Nacional Agraria La Molina]. https://hdl.handle.net/20.500.12996/4924
Gutiérrez, L., Diseño de tamizados genéticos en Saccharomyces cerevisiae usando una biblioteca genómica de plásmidos multicopia []. PE: Universidad Nacional Agraria La Molina; 2021. https://hdl.handle.net/20.500.12996/4924
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title = "Diseño de tamizados genéticos en Saccharomyces cerevisiae usando una biblioteca genómica de plásmidos multicopia",
author = "Gutiérrez Mesías, Luis Gabriel",
publisher = "Universidad Nacional Agraria La Molina",
year = "2021"
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Los tamizados genéticos de sobreexpresión de proteínas son considerados métodos que utilizan análisis modernos para explorar sistemáticamente funciones de genes in vivo. En la presente investigación, se optimizaron los protocolos de dos tamizados que usaron una biblioteca genómica como fuente de diversidad génica. Esta biblioteca proviene de miles de diferentes fragmentos de ADN genómico de la levadura S. cerevisiae. En el primer método, se realizaron réplicas de colonia transformantes que fueron luego expuestas a radiación UV o sembradas en medio con peróxido de hidrógeno. En el segundo método, se utilizaron incubaciones de células transformantes los cuales se distribuyeron en placas para ser expuestas a radiación UV y paralelamente, otros cultivos de transformantes fueron tratados con peróxido de hidrógeno. Posterior a los tamizados, se realizaron ensayos con radiación UV y peróxido de hidrógeno para confirmar los fenotipos positivos mostrados. En el análisis de secuencias de los cinco plásmidos obtenidos de los tamizados, se encontraron genes involucrados en la reparación celular ante presencia de oxidantes. En conclusión, los métodos de tamizados diseñados mostraron ser eficientes para la selección de plásmidos que incluyen genes que contribuyen a mitigar o reparar los daños sometidos a las células de levadura.
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