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Talledo, M., (2019). Desarrollo de una prueba de PCR múltiple para detectar e identificar Bartonella bacilliformis [Universidad Nacional Mayor de San Marcos]. https://hdl.handle.net/20.500.12672/16068
Talledo, M., Desarrollo de una prueba de PCR múltiple para detectar e identificar Bartonella bacilliformis []. PE: Universidad Nacional Mayor de San Marcos; 2019. https://hdl.handle.net/20.500.12672/16068
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Title: Desarrollo de una prueba de PCR múltiple para detectar e identificar Bartonella bacilliformis
Authors(s): Talledo Rivera, Miguel Angel Francisco
Advisor(s): García de la Guarda, Ruth Hortensia
OCDE field: https://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.03
Issue Date: 2019
Institution: Universidad Nacional Mayor de San Marcos
Abstract: El género Bartonella comprende bacterias capaces de infectar glóbulos rojos
y células endoteliales, y que causan al menos tres enfermedades humanas: la
“enfermedad de Carrión”, por Bartonella bacilliformis, la “fiebre de las trincheras”,
por Bartonella quintana, y la “enfermedad del arañazo del gato”, por Bartonella
henselae. Las especies patógenas reconocidas de Bartonella han ido en
aumento durante los últimos veinte años. En el Perú la infección más frecuente
es la Enfermedad de Carrión, causada por Bartonella bacilliformis; sin embargo,
hay reportes de otras bartonelosis en zonas endémicas, por lo que se requiere
de un diagnóstico diferencial rápido y confirmativo.
El objetivo de este estudio fue desarrollar una prueba basada en la Reacción
en Cadena de la Polimerasa con varios marcadores (PCR múltiple), para la
detección e identificación de Bartonella bacilliformis en un solo ensayo.
La bacteria se propagó en agar Columbia con sangre de carnero al 10%, y fue
incubada a 30°C con 5% de CO2 y humedad saturada. Se extrajo el DNA de las
bacterias cosechadas, así como de otras especies bacterianas. Se diseñaron
cebadores específicos para 3 marcadores presentes en Bartonella spp. (flaA,
ITS y 16S-rRNA) para diferenciar a B. bacilliformis con respecto a otras especies,
incluso algunas no relacionadas a ella. Se trabajó con un aislado clínico de
Bartonella bacilliformis (USM-LMM-003) procedente del Cusco. se realizaron las
pruebas de PCR múltiple con estas cepas para estandarizar el método y evaluar
su utilidad.
Se ha desarrollado un protocolo de PCR múltiple capaz de detectar e
identificar bacterias del género Bartonella, con cebadores diseñados en este
estudio y dirigidos a marcadores específicos. El protocolo de la PCR múltiple
desarrollado en este estudio es útil para la detección e identificación confirmativa
de Bartonella bacilliformis en una sola prueba, y también permite diferenciar a
Bartonella bacilliformis respecto de otras especies de Bartonella que es
imposible determinar con otras pruebas.
Link to repository: https://hdl.handle.net/20.500.12672/16068
Discipline: Biología Molecular
Grade or title grantor: Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Facultad de Ciencias Biológicas. Unidad de Posgrado
Grade or title: Magíster en Biología Molecular
Juror: Lazo Manrique, Fanny Elizabeth; Cruz Pio, Liz Erika; Gutiérrez Moreno, Susana Mónica
Register date: 15-Feb-2021; 15-Feb-2021
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