Efecto in vitro de extractos de membrana de bartonella bacilliformis sobre células de cordón umbilical

Abstract

El presente trabajo de tesis se realizó con el objetivo de determinar la influencia de los extractos de membrana de Bartonella bacilliformis in vitro sobre células aisladas de cordón umbilical y que por antecedentes registrados, corroborar la posibilidad que éste tiene de estimular la diferenciación de células madres mesenquimales en Linfocitos. Se tomaron 60 muestras de cordón umbilical, con una longitud promedio de 40 cm en viales estériles conteniendo cada uno 20 mL de medio de cultivo celular Waymouth con antibiótico a 100 UI/ mL de Penicilina y 100 ug/mL de Estreptomicina se codificó y se conservó a - 40°C hasta su procesamiento. Los cultivos de Bartonella bacilliformis fueron obtenidas en el laboratorio de Toxicología de la UNT. Se dividieron en cuatro grupos, cada uno con 15 muestras, A, B, y C los grupos problema y D el grupo testigo o blanco. El procesamiento de las muestras se realizó inicialmente haciendo el homogeinizado de los mismos y luego se le añadió 0.5 mL de colagenasa y 2 mL de Waymouth con gentamicina y V gotas de extracto de membrana de Bartonella bacilliformis , no se añadió extracto de membrana a las muestras testigo y se incubaron a 37°C durante 72 horas .,luego se centrifugó a 3000 rpm por 15 minutos , guardando el sobrenadante a -40°C para identificar la IL-2 y con el precipitado se preparaba un frotis dos por cada muestra. La lectura se hacía a 100 x (inmersión), siguiendo la técnica de Almena, se contaron las células en 100 campos microscópicos. Similar procedimiento se hizo con los preparados de las muestras testigos. La identificación de la IL-2 se realizó en los sobrenadantes de la inducción mediante espectrofotometría UV a 582 nm de longitud de onda. Los resultados fueron la identificación de la IL-2 en las muestras, las mismas que presentaron picos similares a la muestra patrón de IL-2 a 582 nm de longitud de onda., y en los campos microscópicos Linfocitos CD4+ como resultado del proceso de transformación de células madres mesenquimales de cordón umbilical en Linfocitos CD4+ por efecto de los extractos de membrana de Bartonella bacilliformis.