Comparación de dos métodos físicos en el tratamiento del semen fresco de alpaca y su relación con la calidad espermática post congelación

Abstract

La inseminación artificial es una de las tecnologías que han contribuido al progreso genético en diversas especies domesticas de interés económico; sin embargo, la información sobre la colección, características, evaluación y conservación del semen en la alpaca sigue siendo insuficiente. Una de las principales limitantes es la gran viscosidad que presenta el eyaculado, por lo que se requiere evaluar métodos que contribuyan a la licuefacción del semen fresco, someterlo a un protocolo de criopreservación y relacionarlo con la calidad espermática post congelamiento. Para el presente estudio, se utilizó 4 alpacas machos adultos entrenados para la colección de semen por vagina artificial. Se realizó la colección una vez a la semana por 6 semanas hasta un total de 24 muestras. Cada muestra fue evaluada en fresco e inmediatamente se dividió en dos fracciones iguales y se les agregó un dilutor comercial. Cada fracción fue sometida a un esquema diferente en el tratamiento del semen: una fracción (A) fue sometida a la acción mecánica mediante pasajes por una aguja nº 18 y la otra fracción (B) fue sometida a agitación manual. Luego, ambas fracciones fueron centrifugadas a 802 g x 10 minutos. Cumplido el proceso, se retiró el sobrenadante y el pellet fue reconstituido con el dilutor comercial y se sometió a un descenso de la temperatura hasta 5°C y una reevaluación del semen. Posteriormente, se procedió a colocar el semen en pajuelas de 0.5 ml y fueron expuestas al vapor del nitrógeno líquido para luego ser almacenadas en el tanque. Después de 7 días de almacenamiento, las pajillas fueron descongeladas en agua a 37°C por un minutoy se realizaron las respectivas evaluaciones. En los resultados obtenidos post congelación, entre los tratamientos A y B con respecto al porcentaje de motilidad no se halló diferencias estadísticamente significativas entre los dos tratamientos (K-Wkallis:1.67; p>0.05). En relación al porcentaje de espermatozoides vivos, porcentaje de espermatozoides positivos al test de endosmosis (HOST) y al porcentaje de espermatozoides normales tampoco se encontró diferencias estadísticamente significativas entre tratamientos (ANVA, p>0.05).

An important biotechnology with a great impact on the genetic improvement in domestic species is the develop of Artificial Insemination (AI). However, information on the collection, characteristics, evaluation and preservation of semen from the alpaca is still insufficient. The highly viscous nature of camelid semen represents a further challenge to the development of AI technology, which requires evaluation methods that contribute to liquefaction, submit to a cryopreservation protocol and study sperm quality post-thaw. For the present study, 4 male adult alpacas were trained for collection with artificial vagina. Semen collection was performed once a week for 6 weeks for a total of 24 samples. Each sample was assessed for quality parameters in fresh and immediately split into two equal fractions and were added a commercial dilutor. Each fraction was exposed to a different treatment of semen: a fraction (A) was submitted to the mechanical action by passages through a needle N°18 (needling) and the other fraction (B) was submitted to manual shaking. Then, both fractions were centrifuged at 802 × 10 minutes. Completed the process, the supernatant was removed and the pellet was reconstituted with commercial dilutor to be submitted to a temperature drop to 5 ° C and a reassessment of the semen. Then, 0.5 ml straws were loaded with the final dilution and they exposed to liquid nitrogen vapor before they were storaged in the tank. After 7 days, the straws were thawed in water at 37°Cfor a minute to be tested.The results obtained after post-thawed between treatment A (needle passages) and B (hand shaking) for percent motility no statistically significant difference between the two treatments (K-Wkallis: 1.67; p> 0.05) was found. In relation to the percentage of live sperm, percentage of sperm to test positive endosmosis (HOST) and the percentage of normal sperm was not statistically significant differences between treatments (ANOVA, p> 0.05).

Keywords: alpaca, cryopreservation, needling, shaking, centrifugation