Evaluación de la influencia del proceso tafonómico en la obtención de ADN a partir de tejido óseo humano a través de tres metodologías de extracción

Abstract

Determina el impacto de los factores tafonómicos (ácido, alcalino, húmedo/fúngico) en el ADN extraído de muestras óseas antiguas, para comparar tres métodos de extracción y evaluar la eficacia y rendimiento de esta molécula en la investigación. Las metodologías de extracción de la molécula de ADN, a partir de muestras óseas, se rigen con el empleo de técnicas complejas, que con frecuencia tienen que lidiar a diario con serios problemas como el que la muestra se encuentre degradada, la ausencia o escasa cantidad de ADN; así como la presencia de inhibidores que pueden ser extraídos conjuntamente con el ADN. La investigación se realizó para comparar la eficacia de tres procedimientos de extracción de ADN, que a su vez resulten amplificables mediante la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR por sus siglas en inglés) a partir de restos óseos antiguos. De esta manera, se logró evaluar, comparativamente, la presencia de ADN en la muestra, los posibles inhibidores presentes y la procedencia de las mismas para las tres metodologías de extracción: la orgánica, la de desmineralización basada en las aplicaciones y sugerencias de la Comisión Internacional de Personas Desaparecidas (ICMP por sus siglas en inglés) y la metodología que utiliza el Kit de extracción de QIAgen®. Se emplearon inicialmente 169 muestras óseas antiguas recuperadas de fosas clandestinas, las mismas que se encontraron expuestas a diversos medios tafonómicos, que corresponden principalmente a tres mecanismos deteriorantes: impacto ácido, alcalino y microbiano.