Título: Evaluación de la integridad acrosomal de espermatozoides de alpaca en muestras frescas sin fijar (0 horas) y muestras fijadas en formaldehído (24 horas y 1 semana) mediante citometría de flujo
Asesor(es): Santiani Acosta, Alexei Vicent
Campo OCDE: https://purl.org/pe-repo/ocde/ford#4.03.01
Fecha de publicación: 2019
Institución: Universidad Nacional Mayor de San Marcos
Resumen: Evalúa la integridad acrosomal de espermatozoides de alpaca en muestras frescas sin fijar (0 horas) y muestras fijadas en
formaldehido (24 horas y 1 semana) mediante citometría de flujo utilizando el
fluorocromo FITC-PSA. Se procesaron 26 testículos de alpaca procedentes del Camal
Municipal de Ninacaca – Pasco, de los cuales se recuperaron espermatozoides
epididimarios y se formaron 3 grupos (0 horas, 24 horas y 1 semana). Las alícuotas fueron
incubadas por 10 minutos a 38°C en oscuridad con 2.5 μl de FITC-PSA (Stock 100 μg/ml)
para obtener una concentración final de 2.5 μg/ml. Las muestras de 24 horas y 1 semana
fueron fijadas con 100 μl formaldehído al 4% por 30 minutos y luego almacenadas a 4 °C
en oscuridad para posteriormente realizar lavados con PBS por centrifugación a 600 g
durante 8 minutos para retirar el formaldehído, luego se eliminó el sobrenadante y se
agregó 100 µl de PBS a 37 °C para su lectura por el citómetro de flujo. Se consideraron
espermatozoides con integridad acrosomal aquellos que no presentaron fluorescencia
verde (FITC-PSA). Los resultados obtenidos de la integridad acrosomal son a 0 horas
(95.89 ± 4.35), 24 horas (97.24 ± 3.36) y 1 semana (97.21 ± 3.49). Los porcentajes de
integridad acrosomal a las 0 horas fueron comparados con los de 24 horas y 1 semana
utilizando el coeficiente de correlación Pearson, presentándose correlaciones positivas y
fuertes (r=0.8589 y r=0.8419 respectivamente). También se realizó la gráfica de Bland y
Altman, en las cuales la mayoría de los puntos cayeron dentro de los límites de
concordancia del promedio de las diferencias. Por lo tanto, se concluye que los
porcentajes de integridad acrosomal de espermatozoides de alpaca en muestras frescas
sin fijar (0 horas) es similar al obtenido en muestras fijadas en formaldehído (24 horas y
1 semana) determinada mediante citometría de flujo.
Disciplina académico-profesional: Medicina Veterinaria
Institución que otorga el grado o título: Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Facultad de Medicina Veterinaria. Escuela Profesional de Medicina Veterinaria
Grado o título: Médico Veterinario
Jurado: Leyva Vallejos, Víctor Raúl; Olazabal Loaiza, Juan Pavel; Barrios Arpi, Luis Manuel
Fecha de registro: 17-sep-2020