Estandarización de la prueba de susceptibilidad antifúngica in vitro en cepas nativas de dermatofitos por el método de microdilución

Abstract

Establece una prueba de susceptibilidad antifúngica in vitro para cepas nativas de dermatofitos por el método de microdilución, siguiendo las recomendaciones del Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) y con algunas modificaciones. Para lograr el óptimo crecimiento y desarrollo de los hongos dermatofitos se probaron 3 tipos de medios de cultivo, Agar Dextrosa Sabouraud 4% (SAB), Agar Papa Dextrosa (PDA) y Agar Oatmeal incubados a Temperatura ambiente (17 - 22 ºC) y a 28 ºC. Se observó que todas las cepas crecieron mejor en el medio SAB a 28°C con un tiempo de incubación de 7 días. Para la prueba de susceptibilidad antifúngica, se utilizó un inóculo de 0.2 - 5 x 104 UFC/mL; una temperatura de incubación de 35 ºC y un tiempo de incubación de 7 días. Para establecer la lectura de susceptibilidad o resistencia de las cepas, se utilizó la concentración minima inhibitoria al 80% (CMI 80). Se determinó el perfil de sensibilidad in vitro de las seis cepas de dermatofitos tales como, E.floccosum; M.canis; M.gypseum; T.rubrum, T.mentagrophytes y T.tonsurans frente a tres antifúngicos Fluconazol, Itraconazol y Terbinafina. Los valores obtenidos de CMI 80 mediante la técnica de microdilución en caldo oscilaron entre 0.25 μg/mL a 64 μg/mL para Fluconazol, varió de 0.002 a 0.063 μg/mL para Itraconazol y entre 0.002 a 0.032 μg/mL para Terbinafina. De todas los antifúngicos utilizados, la Terbinafina fue la droga con mayor actividad in vitro seguida de Itraconazol y finalmente Fluconazol.