Title: Estandarización del número más probable molecular (NMP - LAMP) para detección de Escherichia coli y Enterococcus faecalis en microcuencas hidrográficas de la región Amazonas
OCDE field: http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.00.00; http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.00; http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.01
Issue Date: 2022
Institution: Universidad Nacional Toribio Rodríguez de Mendoza de Amazonas
Abstract: Actualmente, la contaminación por desechos orgánicos afecta a los cuerpos de agua,
siendo un problema latente a nivel mundial. Así, el agua contaminada puede perjudicar
la salud de los pobladores cuando es usada para consumo humano. Por lo cual, es
necesario realizar análisis microbiológicos del agua, para determinar la presencia de
coliformes como Escherichia coli y Enterococcus faecalis, que son indicadores de la
calidad del agua, y que establecen los criterios para que el recurso hídrico se puede
potabilizar.
Los métodos convencionales para el análisis microbiológico del agua son: La Técnica de
Filtración por Membrana (FM) y el Método del Número más Probable (NMP); estos
métodos son confiables, pero demandan aproximadamente una semana para obtener
resultados finales. Por esta razón, la presente tesis propone el empleo del método
molecular llamado Amplificación Isotérmica Mediada por Bucle (LAMP), que es una
variante del método de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR). La implementación
de la técnica PCR – LAMP permitirá reducir el tiempo para obtener los resultados a unas
pocas horas, y por su probabilidad puede ser usado en campo.
Presentamos los resultados de la estandarización de la técnica del Número Más Probable
Molecular (NMP – LAMP) para la detección de Escherichia coli y Enterococcus faecalis
en microcuencas hidrográficas de la Región Amazonas. Para estandarizar la técnica
LAMP, Se diseñaron cebadores específicos para la detección de los genes LacZ, UidA
para Escherichia coli y 23s rRNA de Enterococcus faecalis; como representantes del
grupo coliformes totales. Así, la presencia de amplificación del ADN bacteriano,
representado por turbidez o precipitado en el tubo de reacción. Fue indicativo de
positividad del ensayo. Posteriormente, un esquema de diluciones seriadas propias de la
técnica del NMP se usaron para la extracción de ADN y amplificación por LAMP.
Finalmente, el ensayo fue desafiado con muestras de aguas de las cuencas hidrográficas
cercanas a Chachapoyas. En este punto se compararon los resultados con la técnica del
NMP convencional realizada simultáneamente; en relación de presencia o ausencia de
dicho microorganismo.
Discipline: Gestión para el Desarrollo Sustentable
Grade or title grantor: Universidad Nacional Toribio Rodríguez de Mendoza de Amazonas. Escuela de Posgrado
Grade or title: Maestro en Gestión para el Desarrollo Sustentable
Juror: Chávez Milla, Julio Mariano; Vásquez Castro, Ernestina Rosario; Arellanos Carrión, Erick Stevinsonn
Register date: 30-Dec-2022; 9-Feb-2023