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Jaime Antonio Ruiz Béjar
Mujica Lengua, Fidel Rodolfo
Santayana Rengifo, Paulo César
2023-05-16T14:15:09Z
2023-05-16T14:15:09Z
2012
TESIS B635_San
http://repositorio.unsch.edu.pe/handle/UNSCH/5285
Con el objetivo de determinar el tiempo óptimo de maduración nuclear in vitro de ovocitos de Vicugna pacos "alpaca" y evaluar la influencia de éste sobre el desarrollo embrionario post-fecundación in vitro, se utilizaron ovocitos de categoría I y II obtenidos por aspiración folicular de ovarios de alpacas sacrificadas en el Camal Municipal de Huancavelica, éstos fueron madurados en medio TCM-199 suplementado con HEPES 25mM, Piruvato de sodio 0.2 mM, Sulfato de gentamicina 50 µg/ml, FSH 0.02 unidades/ml, Estradiol 17-? 1 µg/ml y Suero Fetal Bovino al 10%, e incubados a 38.5ºC en una atmósfera de aire estéril con 5% CO2 y 90% de humedad por espacio de 24, 28 y 32 h. Transcurrido estos tiempos, los ovocitos fueron retirados del medio y sumergidos en una solución de Hialuronidasa al 0.1% para ser despojados de las células del cúmulo. Los ovocitos fueron fijados en una solución de metanol: ácido acético (3:1) y teñidos con orseina acética al 1% para evaluar el estadío de maduración nuclear (Vesícula Germinal-VG, Vesícula Germinal Rota-GVBD, Metafase I-MI, Metafase II-MII). Luego, se realizó la fecundación in vitro y se evaluó el desarrollo embrionario, para lo cual se procedió a madurar los ovocitos del mismo modo que en el ensayo anterior, conservando los tiempos de 24, 28 y 32 h. Se recuperaron espermatozoides epididimarios en medio Sperm-TALP para luego ser lavados y seleccionados mediante la técnica de Swim-up, se utilizó una concentración promedio de 1.5-2x10? espermatozoides/ml para inseminar los ovocitos. Transcurridas las 18 h de fecundación, los presuntos cigotos fueron transferidos al medio mSOF-IVC e incubados por 7 días a 38.5ºC, en una atmósfera de aire estéril con 5% CO2 y 90% de humedad. Los resultados obtenidos muestran que el mayor porcentaje de maduración nuclear (ovocitos en estadía de metafase II- MII) fue alcanzado a las 32 h de cultivo in vitro con un 65.08%, seguida por el de 28 h con un 50.33% y finalmente el de 24 h con un 46.33%. Por otra parte, en cuanto a los resultados del desarrollo embrionario, se notó que los porcentajes de segmentación y blastocistos, aumentaron gradualmente hacia el mayor tiempo de maduración, siendo el de 32 h el tiempo con el mayor índice de desarrollo alcanzado, con un 60.17% y 17.02% para los estadios de segmentación y blastocisto respectivamente. Se concluye que el tiempo óptimo para la maduración nuclear y la adquisición máxima de la capacidad de desarrollo embrionario in vitro, de ovocitos de alpaca, fue de 32 h, bajo las condiciones del presente estudio. (es_PE)
Tesis (es_PE)
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Universidad Nacional de San Cristóbal de Huamanga (es_PE)
info:eu-repo/semantics/openAccess (en_US)
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Universidad Nacional de San Cristóbal de Huamanga (es_PE)
Repositorio Institucional - UNSCH (es_PE)
Ovocitos (es_PE)
Maduración in vitro (es_PE)
Fecundación in vitro (es_PE)
Embriones (es_PE)
Vicugna pacos (es_PE)
Biotecnología reproductiva (es_PE)
Tiempo de maduración de ovocitos de Vicugna pacos "alpaca" en el desarrollo embrionario por fecundación in vitro, Huancavelica 2011. (es_PE)
info:eu-repo/semantics/bachelorThesis (en_US)
Universidad Nacional de San Cristóbal de Huamanga. Facultad de Ciencias Biológicas
Biología
Título profesional
Biólogo en la especialidad de Biotecnología
PE
https://purl.org/pe-repo/renati/level#tituloProfesional
09812690
28298827
https://orcid.org/0000-0002-0446-8458
https://orcid.org/0000-0001-9107-3712
511066
https://purl.org/pe-repo/renati/type#tesis
Pública



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