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Title: PCR en tiempo real y análisis de fusión de alta resolución de amplicones obtenidos de cebadores dirigidos al minicírculo del kinetoplasto para la detección de Leishmania
Advisor(s): Sevilla Andrade, Carlos Raúl
OCDE field: https://purl.org/pe-repo/ocde/ford#3.03.06; https://purl.org/pe-repo/ocde/ford#3.03.07; https://purl.org/pe-repo/ocde/ford#3.04.03
Issue Date: 2023
Institution: Universidad Nacional Mayor de San Marcos
Abstract: Evalúa el desempeño de la reacción en cadena de la polimerasa a tiempo real y análisis de fusión alta resolución de amplicones obtenidos de cebadores dirigidos al minicírculo del kinetoplasto para la detección de Leishmania. El presente estudio es cuantitativo, descriptivo y transversal no experimental. Se usó 9 cultivos almacenados (C1 a C9) de Leishmania, cuyo comportamiento de crecimiento fue evaluado in vitro. Para la PCR en tiempo real y análisis de fusión de alta resolución (PCR HRM), se seleccionaron cebadores empleados en la bibliografía. Con el ADN obtenido de los cultivos, se realizó la PCR HRM y se analizó las temperaturas de fusión halladas, además, se determinó el límite de detección mediante diluciones seriadas. Los recuentos parasitarios de los cultivos C1 al C5 obtuvieron de 30 a 100 millones de parásitos por mL al inicio de la fase estacionaria, y los cultivos C6 al C9 alcanzaron recuentos cercanos al inóculo inicial de 500 parásitos por mL. Se concluye que los cebadores seleccionados determinaron el género y subgénero de los 9 cultivos de Leishmania; los cebadores PASSOS F-PASSOS R a través de la PCR HRM determinaron en los cultivos utilizados los dos subgéneros L. Leishmania y L. Viannia con Tm diferentes entre estos dos grupos. Los cebadores MP1L-MP3H determinaron el subgénero L. Viannia en los cultivos C6 al C9 sin diferencias en sus Tm; y los cebadores PASSOS F-MP3H que amplificaron los cultivos C6 al C9 no hallaron diferencias concluyentes en sus Tm.
Discipline: Tecnología Médica en el área de Laboratorio Clínico y Anatomía Patológica
Grade or title grantor: Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Facultad de Medicina. Escuela Profesional de Tecnología Médica
Grade or title: Licenciado en Tecnología Médica en el área de Laboratorio Clínico y Anatomía Patológica
Juror: Pareja Cuadros, Elizabeth Irene; Huiza Franco De Ortiz, Alina Floralia; Barrón Pastor, Heli Jaime
Register date: 4-Dec-2023; 4-Dec-2023



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