Bibliographic citations
Severo, D., (2022). Propuesta de implementación de la técnica RT-qPCR para la detección molecular temprana del virus dengue en el Laboratorio Referencial de Salud Pública – DIRESA Junín [Universidad Peruana Cayetano Heredia]. https://hdl.handle.net/20.500.12866/11352
Severo, D., Propuesta de implementación de la técnica RT-qPCR para la detección molecular temprana del virus dengue en el Laboratorio Referencial de Salud Pública – DIRESA Junín []. PE: Universidad Peruana Cayetano Heredia; 2022. https://hdl.handle.net/20.500.12866/11352
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title = "Propuesta de implementación de la técnica RT-qPCR para la detección molecular temprana del virus dengue en el Laboratorio Referencial de Salud Pública – DIRESA Junín",
author = "Severo Romero, David Eduardo",
publisher = "Universidad Peruana Cayetano Heredia",
year = "2022"
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El dengue es una enfermedad producida por el virus del dengue. En la actualidad existen diversas técnicas que son utilizadas para su diagnóstico, sin embargo, la RT-qPCR permite obtener resultados confiables y rápidos con una alta sensibilidad y especificidad. Además, a diferencia de la prueba ELISA NS1, nos permite identificar los serotipos del DENV. El objetivo del presente Trabajo de Suficiencia Profesional fue diseñar una propuesta para la implementación de la técnica RT-qPCR para la detección molecular temprana del DENV y sus serotipos en el Laboratorio Referencial de Salud Pública – DIRESA JUNÍN. Se revisó la bibliografía disponible sobre los primers y las sondas que están siendo utilizados para el diagnóstico del DENV y sus serotipos. Estas secuencias fueron evaluadas mediante la herramienta “Nucleotide-BLAST” y en base a los resultados obtenidos se propusieron los primers forward GATTTAGCAACATTCTRGATGTCAT GTT, reverse TTGCACCAACAGTCAATGTCTTCAGGTTC y forward AGAGCAGA TCTCTGATGAATAACCAA, reverse TTGCACCAACAGTCAATGTCTTCAGGTTC para su uso en el diagnóstico de los serotipos DENV-1 y DENV-2 respectivamente. Se elaboró el protocolo para la estandarización de la técnica RT-qPCR y las condiciones mínimas para su operación fueron elaboradas en base a la infraestructura y equipos disponibles en el laboratorio. Los pasos para desarrollar cada actividad se establecieron en los protocolos de recepción de muestras, alicuotado, extracción de ARN viral y RT-qPCR. Finalmente se compararon los resultados de las pruebas ELISA NS1 procesadas en el Laboratorio referencial y los resultados de la RT-qPCR reportados en el sistema NETLAB durante el periodo comprendido entre septiembre 2018 y agosto 2021. Los resultados de la RT-qPCR han demostrado tener mayor sensibilidad y especificidad en comparación de los resultados de la técnica de ELISA NS1. Estos hallazgos demostraron la importancia de la implementación de la RT-qPCR como herramienta de diagnóstico molecular del DENV y sus serotipos en el Laboratorio Referencial de Salud Pública – DIRESA JUNÍN.
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