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Silva, J., (2018). Identificación de las especies del género Leihmania mediante marcadores moleculares de alta sensibilidad a partir de láminas coloreadas con Giemsa empleando la técnica PCR-High Resolution Melting (HRM) [Universidad Nacional Agraria La Molina]. https://hdl.handle.net/20.500.12996/3832
Silva, J., Identificación de las especies del género Leihmania mediante marcadores moleculares de alta sensibilidad a partir de láminas coloreadas con Giemsa empleando la técnica PCR-High Resolution Melting (HRM) []. PE: Universidad Nacional Agraria La Molina; 2018. https://hdl.handle.net/20.500.12996/3832
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title = "Identificación de las especies del género Leihmania mediante marcadores moleculares de alta sensibilidad a partir de láminas coloreadas con Giemsa empleando la técnica PCR-High Resolution Melting (HRM)",
author = "Silva Molina, Juana Iris",
publisher = "Universidad Nacional Agraria La Molina",
year = "2018"
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La leishmaniasis es una enfermedad causada por el protozoario del género Leishmania, que se transmite a los humanos por la picadura de flebótomos infectados. El Perú reportó un promedio de 7000 casos de leishmaniasis cutánea y 430 de leishmaniasis cutáneo-mucosa en el 2016. Las principales especies infectantes del género Leishmania son Leishmania (Viannia) braziliensis, causante del 98% de los casos de leishmaniasis mucosa y cutáneo-mucosa; Leishmania (V.) peruviana, causante de la leishmaniasis cutánea y en menor proporción Leishmania (V.) guyanensis, Leishmania (V.) lainsoni, Leishmania (Leishmania) amazonensis y Leishmania (V.) shawi. La diversidad de especies del género Leishmania y su amplia distribución en el territorio peruano requieren la búsqueda de métodos que permitan identificar las especies de forma sencilla, reproducible y eficiente. En la investigación se realizó el análisis por PCR-High Resolution Melting (HRM) para cuatro marcadores moleculares, la región conservada del minicírculo, ITS-1, hsp70 y cyt b en 243 láminas coloreadas con Giemsa de los años 2010-2013 procedentes de pacientes con lesiones cutáneas. El análisis de genotipificación identificó las especies de Leishmania (V.) peruviana, Leishmania (V.) braziliensis, Leishmania (V.) guyanensis, Leishmania (V.) lainsoni, Leishmania (L.) amazonensis, cuya sensibilidad de técnica fue 93.00%. Además, el análisis de las curvas de disociación o HRMA permitió la identificación de especie de Leishmania desde la concentración equivalente a 1 parásito/reacción. La identificación de especies, el límite de detección y la eficiencia en la identificación especies de Leishmania spp a partir de láminas coloreadas con Giemsa mediante la técnica de PCR- HRM requiere el uso de marcadores multicopia, como la región conservada del minicírculo. La aplicación de la técnica PCR-HRM en muestras de láminas es una herramienta molecular novedosa, sencilla y útil por el fácil almacenamiento y transporte de las muestras de pacientes desde las regiones más lejanas del país, lo cual podría permitir el pronóstico del desarrollo de la enfermedad y estudios epidemiológicos.
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