Evaluación preliminar del nivel de expresión relativa del microARN exosomal miR-21 a partir de plasma sanguíneo como potencial biomarcador del cáncer gástrico

Abstract

El cáncer gástrico (CG) es una enfermedad neoplásica considerada la primera causa de muerte por cáncer en mujeres y hombres en el Perú. Uno de los enfoques actuales para reducir esta tasa de mortalidad es el desarrollo de nuevas metodologías de diagnóstico, ya que las tradicionales son invasivas y brindan diagnósticos tardíos. Se conoce que la aparición y progresión del CG así como de otras neoplasias puede deberse a cambios en el perfil de microARNs, los cuales participan en la regulación pos-transcripcional de la expresión génica. Algunos de ellos han sido propuestos con una alta expectativa para ser nuevos biomarcadores de pronóstico, diagnóstico e inclusive blancos terapéuticos del CG. Diferentes investigaciones han determinado que el microARN miR-21 puede ser transportado mediante exosomas en diversos fluidos corporales de forma circulante, relacionándolo además con algunos tipos de cáncer; sin embargo, su relación con el CG ha sido poco estudiado, además, no se han reportado estudios que analicen los niveles de expresión de miR-21 exosomal en plasma sanguíneo. En la presente investigación evaluamos de forma preliminar el nivel de expresión relativa del miR-21 exosomal plasmático como potencial biomarcador no invasivo asociado al CG. Para ello se estandarizó y optimizó el protocolo de extracción de microARNs exosomales obteniéndose concentraciones de ARNs pequeños exosomales totales mayores de 14.6 ng/uL, así como el protocolo de amplificación de microARNs mediante la técnica Transcripción Reversa – Reacción en Cadena de la Polimerasa en Tiempo Real Cuantitativa (RT-qPCR) en el cual se obtuvieron valores de Ct en congruencia con la abundancia reportada de los microARNs miR-21 y miR-16 (control endógeno). Posteriormente, se determinó el nivel de expresión relativa promedio del miR-21 exosomal plasmático en pacientes con CG (PC), los resultados mostraron una sobreexpresión significativa en PC en comparación con los individuos sanos (IS) (PC vs. IS, 11.184 vs. 1.104, P = 0.0043). Finalmente, teniendo en cuenta la naturaleza preliminar del estudio, se reporta el primer hallazgo del microARN miR-21 exosomal en plasma como posible biomarcador no invasivo para la detección del CG, además de métodos estandarizados para su replicación en nuevos estudios, lo que abre la oportunidad de desarrollar e implementar una herramienta no invasiva para el diagnóstico y/o pronóstico de enfermedades recurrentes en nuestro país con la finalidad de reducir la mortalidad que tanto el CG y otras enfermedades ocasionan.