Bibliographic citations
Flores, R., (2017). Caracterização molecular de bactérias isoladas de lagoas salinas do norte do Perú e avaliação do potencial de novas biomoléculas frente a diferentes tipos de células tumorais [Disertación de maestría, Universidade Estadual de Campinas]. https://renati.sunedu.gob.pe/handle/sunedu/3446132https://hdl.handle.net/20.500.12733/1635039
Flores, R., Caracterização molecular de bactérias isoladas de lagoas salinas do norte do Perú e avaliação do potencial de novas biomoléculas frente a diferentes tipos de células tumorais [Disertación de maestría]. BR: Universidade Estadual de Campinas; 2017. https://renati.sunedu.gob.pe/handle/sunedu/3446132https://hdl.handle.net/20.500.12733/1635039
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title = "Caracterização molecular de bactérias isoladas de lagoas salinas do norte do Perú e avaliação do potencial de novas biomoléculas frente a diferentes tipos de células tumorais",
author = "Flores Calvo, Rene",
publisher = "Universidade Estadual de Campinas",
year = "2017"
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The Salinas lagoons of the North of Peru are geoforms, characterized by depressions or subsidence of the coast of the Pacific Ocean. Saline are considered as extremophilic and halophilic environments due to the presence of salts in water and soil, the main ones being chlorides, followed by sulfides, bicarbonates, bromides of magnesium, calcium and potassium. Sodium chloride, commercially called salt, is exploited by the population living in these areas. The present study aimed to isolate and taxonomically characterize bacteria present in the Salinas de Mórrope and Bayovar lagoons and to evaluate the antiproliferative activity of the crude extracts and their fractions of these microorganisms against different tumoral strains. 211 bacteria were isolated, of which 166 were reactivated and characterized morphologically and 52 were identified by sequencing and phylogenetic analysis of the 16S ribosomal RNA gene. The molecular identification grouped the bacteria in the genera Streptomyces (n = 39), Pseudonocardia (n = 3), Staphylococcus (n = 4), Pseudomonas (n = 2) and Bacillus (n = 2). Twenty-three crude extracts were obtained from the microbial growth and liquid-liquid extraction with the ethyl acetate solvent (AcOEt) for antiproliferative tests with Sulforodamine B (SRB) against tumor lines. The isolates M-92, B-146, B-81 and B-8 belong to the genus Streptomyces and showed promising results against tumor cells, U251 glioma; MCF7 breast; NCI-H460 non-small cell lung type. The isolates M-92, B-146, B-81 grown in three different culture media, NB, ISP2 and R2A were selected for the amplification of the scale, fractionation, isolation and identification of bioactive substances. Results in terms of antiproliferative activity, however higher mass yield was obtained from the ISP2 medium. The crude extract and fractions of the B-81 isolate were evaluated for their potential against antiproliferative activity against a panel of nine tumor lines, U251 glioma, MCF7 breast, NCI-H460 non-small cell lung, UACC-62 melanoma, NCI-ADR / RES multidrug resistant ovary, 786-adenocarcinoma kidney, OVCAR-03 ovary, HT-29 colon and K562 leukemia, and a non-tumor, HaCaT keratinocyte, fraction 3 (MeOH 100%) and fraction 4 (MeOH-AcOEt) the most active. The chemical profile of the crude extract and fractions of the B-81 isolate was investigated by UHPLC-MS and ESI-MS / MS and the molecules identified by m/z were de-replicated It is possible to suggest the presence of substances described in the literature such as Benastatin A, Phoslactomycin C, Actinomycin A, Asparenomycin A, Azinnomycin B, among others; biomolecules already documented, as well as new molecules that may belong to other chemical classes of compounds present in the actinobacteria of the genus Streptomyces. The results obtained in this study demonstrated that the halophilic environment represents a promising source of microorganisms capable of producing new compounds with antiproliferative potential.
Las lagunas del salar en el norte peruano son geoformas caracterizadas por depresiones o hundimiento de la costa del Océano Pacífico. Se consideran ambientes extremófilos y halófilos debido a la presencia de sales en el agua y el suelo, siendo las principales los cloruros seguidos de sulfuros, bicarbonatos, magnesio, calcio y bromuros de potasio. El cloruro de sodio, conocido comercialmente como sal, es aprovechado por la población que vive en estas zonas. El objetivo de este estudio fue aislar y caracterizar taxonómicamente las bacterias presentes en las lagunas de Mórrope y Bayóvar y evaluar la actividad antiproliferativa de los extractos crudos y fracciones de estos microorganismos y sus fracciones frente a diferentes líneas celulares tumorales. Se aislaron 211 bacterias, de las cuales 166 se reactivaron y caracterizaron morfologicamente y 50 se identificadas mediante secuenciación y análisis filogenético del gen 16S del ARN ribosómico. La identificación molecular agrupó las bacterias en los géneros Streptomyces (n=39) Pseudonocardia (n=3), Staphylococcus (n=4), Pseudomonas (n=2) y Bacillus (n=2). Se obtuvieron 23 extractos crudos 23 extractos crudos se obtuvieron a partir del crecimiento microbiano y la extracción líquido-líquido con disolvente acetato de etilo (AcOEt) para las pruebas antiproliferativas con sulforodamina B (SRB) contra líneas celulares tumorales. Los aislados M-92, B- 146, B-81 y B-8 pertenecen al género Streptomyces y mostraron resultados prometedores contra células tumorales, glioma U251; MCF7 de mama; NCI-H460 de pulmón de células no pequeñas. Para la amplificación a escala y el fraccionamiento, aislamiento e identificación de sustancias bioactivas, se seleccionaron los aislados M-92, B-146, B-81 y se cultivaron en tres medios de cultivo diferentes, NB, ISP2 y R2A, de ellos, el medio R2A mostró los mejores resultados en términos de actividad antiproliferativa. Sin embargo, el mayor rendimiento en masa se obtuvo con el medio ISP2. El crudo y fracciones del aislado B-81 se evaluaron por su potencial actividad antiproliferativa contra actividad antiproliferativa contra un panel de nueve líneas celulares tumorales, glioma U251 MCF7 de mama; NCI-H460 de pulmón de células no pequeñas, UACC-62 de melanoma, NCIADR/RES de ovario resistente a múltiples fármacos, 786-O de adenocarcinoma de riñón, OVCAR-03 ovario, cólon HT-29 y leucemia K562, y uno no tumoral, queratinocito HaCaT, con la fracción 3 (MeOH 100%) y la fracción 4 (MeOH-AcOEt) fueron las más activas. El perfil químico del extracto crudo y las fracciones del aislado B-81 se investigó mediante UHPLC-MS y ESI-MS/MS y las moléculas detectadas por relación masa-carga (m/z) se sugieren la presencia de sustancias descritas en la bibliografía como Benastatina A, Foslactomicina C, Actinomicina A, Asparenomicina A, Azinnomicina B, entre otras; biomoléculas que ya son documentados, así como nuevas moléculas que pueden pertenecer a otras clases químicas de compuestos presentes en compuestos presentes en las actinobacterias del género Streptomyces. Los resultados obtenidos en este estudio han demostrado que el medio halófilo representa una fuente prometedora de microorganismos capaces de producir nuevos compuestos con potencial antiproliferativo.
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