?Validaci?n del Examen Microbiol?gico del Bicarbonato de Sodio y Sulfadiazina de plata seg?n USP vigente.?

Abstract

La industria farmac?utica ha alcanzado un auge sobresaliente en el Per?, siendo uno de los contribuyentes econ?micos m?s resaltantes en el pa?s. Por tal motivo, la producci?n de f?rmacos debe estar ligada a la evaluaci?n de la calidad f?sico-qu?mica y microbiol?gica de cada uno de estos. En el caso del control microbiol?gico, el ensayo es general para productos no est?riles, sin embargo, debido a la variedad de f?rmacos existentes en esta categor?a, esta t?cnica debe regirse a un m?todo de validaci?n dise?ado espec?ficamente para cada producto. Debido a lo expuesto anteriormente, este trabajo de tesis se basa en la validaci?n del ensayo microbiol?gico de sulfadiazina de plata y del bicarbonato de sodio por los m?todos de vertido en placa y filtraci?n por membrana respectivamente, de acuerdo a la Farmacopea Americana (USP). Para ello, es necesario contar con cepas microbianas certificadas las cuales van a pasar por un proceso de estandarizaci?n con el fin de obtener un in?culo no mayor a 10 ? 100 UFC para usar en la validaci?n. El ensayo microbiol?gico se divide en prueba de recuento microbiano, de acuerdo a USP cap?tulo 61 y prueba de microorganismos espec?ficos de acuerdo a USP cap?tulo 62. Para el caso de la sulfadiazina de plata, se utilizar?n cinco cepas para el recuento mcirobiano: B. subtilis ATCC 6633, S. aureus ATCC 6538, P. aeruginosa ATCC 9027, C. albicans ATCC 10231 y A. brasiliensis ATCC 16404, mientras que en microorganismos espec?ficos se utilizar?n las cepas E. coli ATCC 8739, S. typhimurium ATCC 14028, P. aeruginosa y S. aureus. En el caso del bicarbonato de sodio para la prueba de recuento se utilizar?n las cepas mencionadas anteriormente y en el caso de microorganismos espec?ficos se utilizar? ?nicamente E. coli. Para ambas pruebas se calcular?n las variables de exactitud, precisi?n, especificidad y robustez de acuerdo a USP cap?tulo 1225. En cada ensayo se realizar? la promoci?n de crecimiento de los medios de cultivo utilizados para garantizar su correcto funcionamiento. En los resultados se demuestra que es v?lido el ensayo microbiol?gico para sulfadiazina de plata por el m?todo de vertido en placa y para bicarbonato de sodio por el m?todo de filtraci?n por membrana. No obstante, se obtiene tambi?n que para la prueba de microorganismos espec?ficos de sulfadiazina de plata es importante mantener en incubaci?n el medio de cultivo de enriquecimiento por no menos de 48 h para asegurar la recuperaci?n de microorganismos, debido posiblemente a una actividad bacteriost?tica de la muestra. The pharmaceutical industry has reached an outstanding upgrade in Peru, by contributing in the most important economic areas in the country. Because of this reason, the production of drugs must be evaluated by meticulous quality control evaluation performed by physiochemical and microbiological assays. Refering about the last one, the principal assay is the non-sterile products microbiological examination, however, due to the huge variety of drugs in this category, these techniques used have to be vaidated designing an specific assay for each pharmaceutical product. Thus, this thesis has it?s basis in validate the microbiological assay of silver sulfadiazine and sodium bicarbonate using poured on plate and membrane filtration methods respectively, according to the U.S. Pharmacopea (USP). So that, is neccesary to count on certificated bacteria and fungi strains to realize an standarization process in order to obtain an aliquot that containts 10 ? 100 CFU, this aliquot is going to be use in the validation assay. The microbiological examination is divided in two tests: microbiological counting test, according to chapter 61 of USP, and specific microorganism test, according to chapter 62 of USP. The silver sulfadiazine microbiological counting test will be accomplished with five certificated strains: B. subtilis ATCC 6633, S. aureus ATCC 6538, P. aeruginosa ATCC 9027, C. albicans ATCC 10231 and A. brasiliensis ATCC 16404; instead of the specific microorganisms test, that will be using E. coli ATCC 8739, S. typhimurium ATCC 14028, P. aeruginosa and S. aureus. In case of sodium bicarbonate microbiological counting test, it will be realized with the same five strains mentioned before; nevertheless, the specific microorganism test, wil be realized with only E. coli. For both validation assays, the variables of accurancy, precisi?n, specificity and robustness will be calculated accordind to USP?s chapet 1225. The growth promotion test will ve also executed for each experimental assay in this thesis in order to assure the correct functioning of the culture media. Results show that the microbiological assay for silver sulfadiazine and sodium bicarbonated are valid for each method that have been perfomed. However, it is also important to mention that the results of the specific microorganism test for silver sulfadiazine prove that the enrichment media incubation time must be no less tan 48 hours, in order to be sure that the test i sable to recover any pathogen microorganism. This characteristic could be due to a bacteriostatic activity of the sample.