Determinación de niveles de metabolitos de triclabendazol y albendazol en leche y sus potenciales efectos inmunótoxicospor exposición crónica en ovinos

Abstract

El presente trabajo de investigación se realizó con el objetivo de determinar la presencia de niveles de residuos en leche de los antihelmínticos benzimidazoles Triclabendazol (TCBZ) y Albendazol (ABZ), usados frecuentemente en el control de Fasciola hepatica, parásito trematode que afecta a rumiantes domésticos, principalmente bovinos y ovinos, se evaluó además sus potenciales efectos inmunotóxicos por exposición crónica en ovinos. Se determinó la presencia de niveles de los metabolitos residuales del TCBZ (TCBZ SO y TCBZ SO2 y ABZ (ABZSO y ABZSO2) en 30 muestras de leche cruda bovina comercializada en el distrito de Cajamarca mediante la técnica de Cromatografía Líquida Acoplada a Espectrometría de Masas en Tándem (LC-MS/MS). El método fue validado de acuerdo con las directrices 2002/657/EC. La selectividad fue demostrada, los analitos presentaron valores de recuperación entre 80% y 100%. Se demostró la presencia de residuos de TCBZ en el 23% de las muestras analizadas. Las concentraciones de residuos excedieron en el 26.65% (44-305 µg/kg), el LMR permitido. El metabolito TCBZ SO2 se encontró en el 70% de las muestras positivas, TCBZ SO (20%) y TCBZ (10%) respectivamente. No se encontraron residuos de metabolitos de ABZ. Los resultados obtenidos fueron comparados con los estándares establecidos por el Codex Alimentarius y EMEA. Los resultados indican que en Cajamarca se comercializa leche con residuos de TCBZ. Se evaluó el efecto del TCBZ sobre las respuestas celulares en sangre de: eritrocitos, hematocrito, leucocitos, subpoblaciones linfocitarias CD4 y CD8 y la expresión de citoquinas IL4 e IFNγ en linfocitos T de sangre periférica de ovinos infectados con F. hepatica. El estudio se llevó a cabo en 14 ovinos, los animales del grupo en tratamiento (n=8) fueron experimentalmente infectados con metacercarias de F. hepatica y a 7 tratamientos continuados con TCBZ. El grupo control (n=6) se mantuvo libre a la infección con F. hepatica y al tratamiento con antihelmínticos. Los efectos del tratamiento con TCBZ en animales infectados experimentalmente con F. hepatica, sobre los valores hematológicos mostraron una disminución significativa de eritrocitos, hematocrito y leucocitos (p<0.05), se observó una leve a moderada linfopenia, neutrofilia y eosinofilia. Los valores hematológicos en el grupo control estuvieron dentro de los rangos normales de referencia, excepto por una leve neutrofilia y eosinofilia transitoria al inicio y al final del experimento respectivamente. Los leucocitos al inicio del tratamiento mostraron una elevación moderada, para luego observarse leucopenia (p<0.05) en el grupo infectado. Las respuestas de Linfocitos CD4 y CD8 se encontraron elevadas en comparación con el grupo control, la respuesta de citoquina IL4 tuvo mayor expresión en relación a IFNγ en comparación con el grupo control (p<0.05) durante la fase crónica de la enfermedad y durante el tratamiento con TCBZ. Se evaluó la eficacia del TCBZ, mediante la prueba de FECRT, mostrando una reducción para el grupo en tratamiento del 40.64% después de 7 tratamientos consecutivos. La eficacia del TCBZ a las dosis de 12, 24 y 48 mg/kg. de p.v. administrados por vía oral, en ovinos artificialmente infectados con F. hepatica, fue de 53.10%, 26.65%, 25.53%, 26.55%, 41.40%, 54.54% y 55.64% respectivamente. Se concluye que, a pesar del incremento en las dosis de desafío del antihelmíntico suministrado a intervalos de tiempo muy corto, no mejoró el porcentaje de eficacia del TCBZ.