Title: Determinación In Vitro del Efecto Apoptótico del Cannabinoide Win 55, 212,2 sobre Células de Cáncer de Cuello Uterino (Hela) - Boston 2015
OCDE field: https://purl.org/pe-repo/ocde/ford#3.01.05
Issue Date: 7-Sep-2016
Institution: Universidad Católica de Santa María
Abstract: El cáncer representa una de las principales causas de muerte en el mundo. En el caso
de nuestro país, esta enfermedad ocupa el segundo lugar, siendo el de mayor
incidencia en mujeres, el cáncer de cuello uterino. Se han propuesto nuevos enfoques
terapéuticos para tratar dicha patología, uno de ellos es inducir la apoptosis de las
células cancerígenas, es por ello que el presente estudio tiene como propósito
investigar el posible efecto apoptótico de un agonista sintético no selectivo de los
receptores cannabinoides (WIN55, 212-2) sobre la línea celular HeLa (cáncer de
cuello uterino). La investigación es de naturaleza experimental y fue realizada en el
Laboratorio de Farmacología de la Universidad Massachusetts College of Pharmacy
and Health Sciences de Boston, EEUU en el año 2015.
Para comprobar la presencia de los receptores cannabinoides en la línea celular
HeLa, tanto del receptor cannabinoide tipo 1(CB1) como del receptor cannabinoide
tipo 2 (CB2), se realizó la técnica Western Blot en la que se empleó anticuerpos antireceptor
cannabinoide I y II para su identificación. El efecto apoptótico fue evaluado
con la disminución del porcentaje de células viables. Se utilizó el cannabinoide WIN-
55,212-2 en concentraciones de 0.1 μM, 0.3 μM, 1 μM, 3 μM, 10 μM y 30 μM sobre
dicha línea celular, luego de 24 horas se midió la viabilidad celular a través de la
técnica MTS y se expresó como porcentaje del grupo control. El análisis estadístico
fue realizado a través de los test ANOVA y Dunett. El efecto apoptótico producido
X
por el cannabinoide fue verificado con la activación de la caspasa 3 mediante un
ensayo de Luminiscencia. También se utilizó un antagonista selectivo para el
receptor CB1 (AM251), para observar si existía un cambio en el efecto producido por
el agonista.
Se demostró la presencia de ambos receptores cannabinoides en la línea celular
HeLa, a través de bandas apreciadas en las membranas incubadas con los respectivos
anticuerpos. Se comprobó la muerte celular de la línea HeLa producida por el
cannabinoide WIN55, 212,2, ya que dicho efecto fue reflejado en la disminución
significativa de la viabilidad celular y la activación de la caspasa efectora 3. Sin
embargo, cuando se bloqueó el receptor CB1 con un antagonista selectivo, la
viabilidad celular no aumentó significativamente, por lo que se puede deducir que
efecto apoptótico no era mediado por dicho receptor, sino por el receptor CB2 u otro
receptor. Se concluye que el cannabinoide WIN55, 212-2 induce la muerte celular de
las células de cáncer de cuello uterino, siendo la concentración más efectiva la de
30μM, debido a que disminuye la viabilidad celular en un 67% después de 24 horas
de haber sido aplicado dicho tratamiento. Asimismo, se comprobó que el efecto
apoptótico μμera producido vía la activación de las caspasas efectoras. Estos
hallazgos brindan un nuevo enfoque para el tratamiento de esta patología.
Discipline: Farmacia y Bioquímica
Grade or title grantor: Universidad Católica de Santa María.Facultad de Ciencias Farmacéuticas, Bioquímicas y Biotecnológicas
Grade or title: Químico Farmacéutico
Register date: 7-Sep-2016