Evaluación de la actividad citotoxica de saponinas y sapogenias provenientes de residuos de Chenopodium quinoa willd. sobre Lineas celulares SH-Sy5H, Hela A549 y HepG2

Abstract

Actualmente el cáncer es considerado la segunda causa de muerte a nivel mundial habiendo un aumento drástico en su incidencia, las estadísticas indican que hoy en día se diagnostican 10 millones de nuevos casos por año en todo el mundo, y al menos que se prevenga de forma efectiva, se estima que el número aumentará a 20 millones en 17 años. Los tratamientos como; la cirugía, radiación, quimioterapia, terapias dirigidas e inmunoterapias aplicadas por separado o en combinación se usan comúnmente para tratar esta enfermedad, sin embargo, estos pueden causar severos efectos secundarios; es por ello que se necesita encontrar nuevos métodos que sean eficaces y que los pacientes tengan una mejor tolerancia al tratamiento. Las recientes investigaciones están enfocadas en mejorar el uso potencial de compuestos naturales para el tratamiento de esta patología, se sabe por estudios que la quinua (Chenopodium quinoa Willd.) es una planta con altos valores proteicos que soluciona problemas como nutrición; sin embargo dentro de su composición contiene antinutrientes como los saponósidos, también conocidos como saponinas, que son glucósidos naturales compuestos por una sapogenina triterpenoide unida a un monosacárido, tanto la saponina como su aglicón poseen una amplia gama de propiedades biológicas, incluida la actividad citotóxica sobre la cual no se encuentra suficiente evidencia acerca de su efectividad clínica. Nuestro objetivo fue determinar la actividad citotóxica producida por los extractos etanólicos de Chenopodium quinoa Willd (roja y blanca) y los estándares de Acido Oleanólico, Acido Ursólico y Hederagenina en células A549, SH-SY5Y, HepG2 y HeLa, así como conocer la concentración inhibitoria media (IC50) de los mismos, además, se evaluó si la citotoxicidad inducida por las sapogeninas activa la vía apoptótica a través de Caspasa 3 (enzima efectora de la apoptosis), asimismo se valoró la presencia de la proteína PARP-1 (proteína reparadora de ADN) ejecutando Western Blot, la determinación cualitativa de las saponinas y sapogeninas se realizó mediante vi cromatografía en capa fina (TLC) usando el revelador Liebermann- Burchard, por último se determinó cuantitativamente la presencia de sapogeninas en ambas quinuas, empleando cromatografía líquida de alta performance (HPLC). Los resultados obtenidos de IC50 en Acido Ursólico fueron 21.9 μM para A549, 11.2 μM en HeLa, 104.2 μM en HepG2 y 6.2 μM para SH-SY5Y, en el caso de Acido Oleanólico las concentraciones fueron de 98.9 μM para A549, 83.6 μM en HeLa, 408.3 μM en HepG2 y 34.1 μM para SH-SY5Y, con Hederagenina se detectó 78.4 μM, 56.4 μM, 40.4 μM y 12.3 μM en A549, HeLa, HepG2, SH-SY5Y respectivamente. En relación ensayo realizado con Caspasa 3, se determinó que la línea celular HeLa mostró un mayor incremento de actividad caspasa con respecto a las otras líneas celulares, es por ello que se continuó con esta línea para señalar el incremento de las proteínas PARP escindidas frente a Acido Oleanólico, Acido Ursólico y Hederagenina, afirmando que dichas sapogeninas inducen mecanismo de muerte celular mediante apoptosis, se pudo afirmar que entre todos los tratamientos con los 3 diferentes estándares, la concentración que causó una mayor escisión de la proteína PARP fue 100 μM de Hederagenina, por lo que se puede decir que a esta concentración esta sapogenina puede causar muerte celular tipo 1 mediante la vía de las caspasas. Asimismo, los resultados del HPLC mostraron que hay 2.805 mg/g de Acido Oleanólico y 4.715 mg/g de Hederagenina por cada gramo de polvo de Quinua Blanca y 2.65 mg/g de Acido Oleanólico y 7.22 mg/g de Hederagenina por cada gramo de polvo de Quinua Roja.