Evaluación de la Capacidad Antioxidante del Extracto de la Microalga Haematococcus Pluvialis, por el Ensayo OracFL en el Lector de Placas Varioskan Lux

Abstract

El ensayo de la capacidad de absorbancia del radical oxígeno, más conocido como ORAC, es un método para hallar la capacidad antioxidante de extractos y sustancias, el cual expresa sus resultados en equivalentes Trolox. La astaxantina es uno de los antioxidantes más potentes conocidos actualmente, y la microalga Haematococcus pluvialis es capaz de sintetizar este antioxidante en situaciones de estrés. El interés biotecnológico por el cultivo de esta microalga en los últimos años ha aumentado, y se han generado diversas técnicas de cultivo, así como distintos tipos de fotobiorreactores para su crecimiento, y todo esto debido al antioxidante que es capaz de sintetizar, el cual es muy bien cotizado en el mercado de los antioxidantes (aprox.: $3000/kg de astaxantina)(1). En la primera parte del presente trabajo de investigación se diseñaron y se construyeron, 3 fotobiorreactores air-lift, en los cuales se cultivó una cepa de microalgas, que a la descripción microscópica coincidió con el género Scenedesmus y Chlorella vulgaris. En una segunda parte se procedió a purificar y cultivar la cepa de la microalga Haematococus pluvialis, en medios sólidos modificados para poder inducir al estrés a esta microalga, obteniendo colonias de esta cepa estresada. Luego se buscó comparar el funcionamiento del equipo Realplex2 y Varioskan LUX para realizar el ensayo ORAC, para luego medir la capacidad antioxidante de los extractos obtenidos utilizando una modificación del ensayo ORAC, denominado ORAC-L, el cual utiliza una molécula llamada β-ciclodextrina metilada, para solubilizar antioxidantes lipofílicos. La capacidad antioxidante utilizando el ensayo ORAC-L, de los extractos obtenidos en promedio fueron: para la muestra de extracto de la microalga H. pluvialis: 9690.00 eq. Trolox (μM)/ mL, para la muestra de extractos de microalgas obtenidas en los fotobiorreactores: 5213.33 eq. Trolox (μM)/ mL; en ambos casos se utilizó dimetilsulfóxido como solvente, y para el ensayo ORAC-H del extracto de la microalga H. pluvialis: 2987.33 eq. Trolox (μM)/ mL. Estos valores respaldan finalmente la hipótesis en la cual se planteaba obtener extractos antioxidantes a partir de la microalga H. pluvialis. Palabras clave: ORAC, Haematococcus pluvialis, Fotobiorreactores, Capacidad antioxidante.