Fragmentación del ADN y aneuploidías cromosómicas en espermatozoides asociados al diagnóstico genético preimplantacional en pacientes subfértiles

Abstract

Evalúa el factor masculino de los pacientes con historial de infertilidad, estandarizando y llevando a cabo dos pruebas que son de interés diagnóstico como la fragmentación del ADN en espermatozoides, conocida como SCD, la cual se basa en la dispersión de la cromatina ante agentes denaturantes ácidos y ell FISH en espermatozoides, que busca conocer el riesgo de un paciente a formar aneuploidías cromosómicas en el proceso de espermatogénesis, este diagnóstico se correlacionó con los resultados en embriones cuando se realizó el Diagnóstico Genético Preimplantacional (PGD). La prueba de SCD fue estandarizada tomando solo dos tipos de comportamientos de dispersión que son: la dispersión y la no dispersión de la cromatina. La inducción a la descompactación se consiguió con tratamientos denaturantes a pH ácido y se visualizó por microscopía de fluorescencia. Para la evaluación cromosómica de los espermatozoides por FISH, las muestras fueron hibridadas para los cromosomas 13, 18, 21, X e Y. En el análisis del PGD, las muestras tomadas por las clínicas de fertilidad fueron recibidas en el laboratorio para el análisis de hibridización fluorescente in situ de una sola célula. Los resultados del SCD indican que el 30,51% de los pacientes presentaron índices de fragmentación del ADN (DFI) elevados. Se observó una relación directamente proporcional entre la edad y el DFI; se estableció un nuevo punto de corte de 29%. El 34,26% de los pacientes que se sometieron a la prueba de FISH en espermatozoides resultaron afectados por presentar aneuploidías cromosómicas. Con el PGD se muestra un riesgo incrementado de segregación de aneuploidías por vía paterna pasando desde un 30,71% de normalidad hacia un 19,14%. Nuestros resultados indican que la fragmentación de ADN en espermatozoides no se relaciona con las aneuploidías cromosómicas por ser eventos independientes y que las aneuploidías cromosómicas detectadas por FISH en espermatozoides conllevan a un riesgo embrionario, recomendándose el PGD.