Determinación de la Eficacia Inmunogénica de antígenos de Echinococcus Granulosus en perros infectados experimentalmente

Abstract

La equinococosis quística representa una grave zoonosis parasitaria en nuestro país y otros países en desarrollo dedicados a la ganadería. El agente causante es el céstodo Echinococcus granulosus, cuyo estadio adulto se desarrolla en el intestino delgado de hospederos definitivos (caninos) y el desarrollo del estadio larval se presenta principalmente en el hígado y pulmón de hospederos intermediarios como el ganado ovino. Una vacuna que proteja a los perros permitiría disminuir la biomasa parasitaría y la carga de huevos que infecta al rebaño. Por ello se evaluó la imnunoprotección contra E. granulosus empleando de antígenos de superficie como proteínas de membrana y productos metabólicos de excreción-secreción de protoescólices, y parásitos adultos. Las proteínas de membrana fueron obtenidas por extracción con Tritón x-114 y los productos de excreción/secreción (E/S) obtenidos por cultivo in vitro (Medio HAM F12). Además, se obtuvo antígeno total de la tenia adulta por sonicación. Se usó Quil A (50 g/ml) como adyuvante. Los antígenos fueron administrados por vía intranasal y se emplearon 12 perros divididos en cuatro grupos de tratamiento: control, E/S, proteínas de membrana (PM) y proteína total. Los animales recibieron tres inmunizaciones en intervalos de 15 días; se enfrentaron con 150000 protoescólices viables por vía oral, 15 días después de la última inmunización. Los perros fueron sacrificados entre 49-53 días después del enfrentamiento. Se evaluó la carga parasitaria y la presencia de huevos. Los grupos E/S y PM tuvieron menor carga parasitaria y ausencia de huevos en comparación al control, aunque no hubo diferencia estadística significativa. Los resultados muestran la posibilidad de continuar estudios con estos antígenos, ya que la inhibición del desarrollo embrionario es crucial para detener la transmisión a hospederos intermediarios y al hombre.

-- Palabras clave: Echinococcus granulosus, protoescólex, inmunización, antígeno excretorio-secretorio, equinococosis quística.

Cystic echinococcosis is a serious parasitic zoonosis in our country and other developing countries dedicated to livestock. The causative agent is the tapeworm Echinococcus granulosus, whose adult stage takes place in the small intestine of definitive hosts (dogs) and the development of the larval stage occurs mainly in the liver and lung of intermediate hosts such as sheep. A vaccine to protect dogs would reduce the parasitic biomass and burden of eggs that infecting the flock. Therefore imnunoprotección was evaluated against E.granulosus using surface antigens as membrane proteins and metabolic products of excretion-secretion protoscoleces and adult worms. Membrane proteins were obtained by extraction with Triton x-114 and the products of excretion/secretion (E/S) obtained by in vitro culture (Medium HAM F12). Furthermore, the total antigen obtained had grown by sonication. Quil A was used (50 g/ml) as an adjuvant. The antigens were administered intranasally and 12 dogs were used divided into four treatment groups: control, E/S, membrane protein (PM) and total protein. Animals received three immunizations at 15 days intervals; protoscoleces faced viable 150000 orally, 15 days after the last immunization. The dogs were sacrificed between 49-53 days after challenge. Parasite load was evaluated and the presence of eggs. Groups E/S and PM had lower parasite load and absence of eggs compared to the control, although there was no statistically significant difference. The results show the possibility of continuing studies with these antigens, since inhibition of embryo development is critical to stop the transmission intermediate hosts and man.

Key Words: Echinococcus granulosus, protoscoleces, immunization, excretory-secretory antigen, cystic echinococcosis.