Caracterización preliminar del Sistema de la Línea Lateral del pez Killi africano Nothobranchius furzeri

Abstract

La sordera y los déficits auditivos son frecuentemente causados por la pérdida de Células Internas Ciliadas (CCI). A diferencia de los mamíferos, los peces pueden regenerar las CCI de sus órganos sensoriales denominados neuromastos. La comprensión de este fenómeno regenerativo es necesario para el desarrollo de posibles terapias génicas contra la sordera. En la actualidad la mayoría de estos estudios se han llevado a cabo en la Línea Lateral Posterior (LLP) del pez cebra (Danio rerio). A pesar de los avances usando este modelo animal no se ha podido identificar en su totalidad los componentes del núcleo básico de la Red Regulatoria Génica (RRG) para llevar a cabo la regeneración de las CCI. Una alternativa es el uso de un enfoque comparativo usando otro modelo animal con la misma capacidad regenerativa para este órgano. En así que el pez Killi Notobranchius furzeri se presenta como un gran candidato ya que ha mostrado una gran capacidad regenerativa para otros contextos. En esta tesis se intenta caracterizar de forma preliminar la LLP del pez Killi. Para esto, se realizo la caracterización a tres niveles: molecular, celular y de tejido. En el primer nivel usando hibridación fluorescente in situ (HFIS) se mostro que los neuromastos del pez killi presentan subgrupos celulares, los cuales son comparables a los previamente reportados en el pez cebra. A nivel de tejido, usando el sistema Tol2 se genero una línea transgénica que exprese la proteína potenciada fluorescente verde de forma especifica en todo el sistema lateral facilitando así la visualización de los neuromastos individuales por microscopia. Por último, a nivel celular, a través de la microscopia con animales vivos y el conteo total de células individuales de los neuromastos se determino que el estadio de desarrollo aproximado donde los neuromastos alcanza su máximo tamaño es a los 30 días post eclosión (dpe) determinando así el estadio ideal para experimentos regenerativos. En resumen, el presente estudio contribuye a establecer las bases para trabajos posteriores en la caracterización de la LLP y la regeneración de CCI en el pez killi y su comparación con el pez cebra.