Caracterización de un nuevo flavivirus aislado de Culex (melanoconion) ocossa de Iquitos, Perú

Abstract

Describe el aislamiento y caracterización molecular de un nuevo flavivirus únicamente de mosquito, aislado de Culex (Melanoconion) occossa colectados en 2009 de un área urbana de Iquitos, Perú, ubicada en la cuenca del Amazonas, en la región noreste del Perú. La evidencia del Flavivirus es detectada mediante ensayo de inmunofluorescencia indirecta (IFI) en sobrenadante de cultivo celular de las células infectadas C6/36 usando anticuerpos policlonales grupo de Flavivirus y confirmada por RT-PCR. En comparación por pares de las secuencias de la región ENV, la más alta de nucleótidos (47,4%) y de aminoácidos (39,8%) la identidad se observa en el virus Nounané (NOUV). En comparación por pares de la región NS5, la identidad de nucleótidos más alta se observa en el virus Spondweni (65,9%), el virus de Iguape (IGUV; 65,7%) y el virus de Kedougou (65,6%); sin embargo, en el nivel de aminoácidos, la más alta identidad en pares de bases se observa en IGUV (69,8%), virus Naranjal (69,6%) y el virus Bussuquara (69,3%). El análisis filogenético utilizando ENV parcial y secuencias de aminoácidos NS5 revela que este Flavivirus forma un clado con NOUV. Para investigar la gama de huéspedes del nuevo Flavivirus, se inoculan una variedad de células de mamíferos (Vero 76, Vero E6, BHK, LLCMK y MDCK) con el tercer pasaje del aislamiento C6/36 y monitorea el efecto citopático (EC). No se detecta EC, y todas las líneas de células de mamífero son negativas para el antígeno Flavivirus por IFI y ARN Flavivirus por RT-PCR luego de catorce días de incubación. Propone que este Flavivirus genéticamente diferente sea llamado Nanay Virus (NANV), debido a la zona de Iquitos, Perú, donde fue detectado por primera vez.