Determinación de la frecuencia del gen CTX-M QUE CODIFICA β-lactamasa de espectro extendido (BLEE) EN Escherichia coli uropatógenas aisladas en el Hospital Guillermo Almenara de marzo a mayo del año 2012

Abstract

De todas las infecciones, las del tracto urinario (ITU) son después de las infecciones de las vías respiratorias, las más frecuentes en la atención primaria. Los patógenos que causan estas infecciones son varios, pero el más común es Escherichia coli. Entre los antibióticos usados en el Perú para la terapia de las infecciones urinarias destacan las cefalosporinas y el mecanismo más importante de resistencia a estos antibióticos en las enterobacterias es la producción de betalactamasas de espectro extendido (BLEE). Hay varios tipos de BLEE, entre ellas las TEM, SHV y OXA, pero en 1989 se encontró un aislado clínico de Escherichia coli que producía una encima diferente a éstas a la que se le denominó CTX-M por su actividad hidrolítica preferente sobre cefotaxima. Las BLEE de tipo CTX-M han requerido relevancia epidemiológica por su dispersión intra y extrahospitalaria. Se han hecho investigaciones que demuestran que los aislados de E. coli productores de BLEE tipo CTX-M son prevalentes en Sudamérica, sin embargo en el Perú son pocos los estudios realizados al respecto. El objetivo de este estudio fue determinar a nivel fenotípico y molecular la presencia y frecuencia de genes que codifica BLEE del tipo CTX-M en cepas de E. coli provenientes de urocultivos. En un estudio observacional. Se colectaron 50 cepas de E. coli provenientes de urocultivos del Hospital Guillermo Almenara Irigoyen (HNGAI) entre marzo y mayo del 2012. Se confirmó la identificación de los aislados y se realizó el antibiograma mediante la técnica de Kirby - Bauer. La determinación de la producción de BLEE se hizo siguiendo los criterios del CLSI así como el método de Jarlier. Las plásmidos se extrajeron con el kit Pure Yield ™ Plasmid Miniprep System, Novagen. El gen blaCTX-M se evidenció mediante amplificación por PCR, visualizándose mediante electroforesis horizontal en gel de agarosa al 1%. Se determinó que el 58.3% de E. coli aisladas de urocultivos eran productoras de BLEE, de las cuales el 85.7% presentaron el gen de resistencia blaCTX-M en plásmidos. Se concluye que el principal mecanismo de resistencia en Escherichia coli aisladas de urocultivos del HNGAI, entre marzo y mayo del 2012, es la producción de BLEE, siendo el tipo CTX-M de elevada frecuencia (85.7%). Esto concuerda con lo reportado en otros países y es un conocimiento que aporta información valiosa que debe tomarse en cuenta para vigilar el progreso de la resistencia a los antibióticos en nuestro país. Palabras clave: BLEE, blaCTX-M, ITU, PCR y UPEC.

--- Of all infections, urinary tract infection (UTI) are after the infections of the respiratory tract, the most common in primary care. The pathogens that cause these infections are several, but the most common is Escherichia coli. Among the antibiotics used in Peru for therapy of urinary tract infections include cephalosporins and the most important mechanism of resistance to these antibiotics in enterobacteria is the production of extended-spectrum betalactamases (ESBLs). Several types of ESBL, including TEM, SHV and OXA, but in 1989 a clinical isolate of Escherichia coli producing a different enzyme which these was called CTX-M for its preferential hydrolytic activity on cefotaxime was found. The CTX-M type ESBLs have acquired its epidemiological relevance and intra-hospital spread. Research has been done showing that isolates of E. coli producing CTX-M type ESBLs are prevalent in South America, but in Peru are few studies about it. The objective of this study was to determine phenotypic and molecular level the presence and frequency of genes encoding ESBL CTX-M type strains of E. coli from urine cultures. In an observational study. 50 strains of E. coli from urine cultures of the Hospital Guillermo Almenara Irigoyen (HNGAI) between March and May 2012 were collected. Identification of isolates is confirmed and sensitivity is performed by the technique of Kirby - Bauer. The determination of ESBL production was made following CLSI criteria and the method of Jarlier. The plasmids were extracted with the kit Pureyield ™ Plasmid Miniprep System, Novagen. The blaCTX-M gene evidenced by PCR amplification, displayed by horizontal electrophoresis in agarose gel 1%. It was determined that 58.3% of E. coli isolated from urine cultures were ESBL producers, 85.7% of which presented resistance gene in plasmids blaCTX-M. It is concluded that the main mechanism of resistance in Escherichia coli isolated from urine cultures of HNGAI between March and May 2012, is the production of ESBL, the CTX-M being high frequency (85.7%) type. This is consistent with those reported in other countries and is knowledge that provides valuable information that should be considered to monitor the progress of antibiotic resistance in our country. Keywords: ESBL, blaCTX-M, ITU, PCR and UPEC.