Aislamiento y caracterización de enterovirus en enfermedad tipo influenza en niños menores de 15 años, Piura 2011

Abstract

Los enterovirus (EV) son la causa más común de infecciones de las vías respiratorias en humanos y se clasifican en siete especies (EV A-D y rhinovirus [RHV] A-C) con más de 200 serotipos diferentes. Poco se sabe acerca del rol de EV en las infecciones respiratorias en América del Sur. El objetivo principal de este estudio fue determinar la prevalencia de los EV en niños ≤ 15 años con enfermedad tipo influenza incluidos en un estudio de vigilancia pasiva de Influenza y otros virus respiratorios en el distrito de Piura durante el año 2011. Se obtuvo de cada participante una muestra de hisopado faríngeo y datos epidemiológicos. El aislamiento viral se realizó mediante cultivo celular utilizando cuatro líneas celulares (LLCMK2, Vero E6, RD y A549). La identificación y determinación del serotipo de EV se realizaron mediante el ensayo de inmunofluorescencia utilizando anticuerpos monoclonales. Los aislamientos no serotipificables por inmunofluorescencia, fueron seleccionados para su análisis mediante RT-PCR, seguido por secuenciamiento. En total se analizaron 424 muestras, aislándose EV en 47 muestras (11,1%). 46.8% de estos EV se encontraron en niños ≤ 1 año de edad. Nuestros resultados revelaron un predominio de especies EVB (62,5%). No se aislaron especies EVD. Se identificaron quince serotipos, 4 EVA, 8 EVB, y 2 EVC. Por otra parte, siete muestras no pudieron ser correctamente clasificadas con nuestra metodología. Los serotipos más frecuentes fueron coxsackievirus B2, coxsackievirus A2, y echovirus 9. El uso de células RD y A549 incrementó el aislamiento de EV. Este estudio proporciona datos sobre los serotipos de EV que circulan en el distrito de Piura y establece la necesidad de realizar más estudios.

Enteroviruses (EVs) are the most common cause of respiratory tract infections in humans and are classified into seven species (EVA-D and rhinovirus [RHV] A-C) with more than 200 different serotypes. Little is known about the role of EVs in respiratory infections in South America. The main objective of this study was to determine the prevalence of EVs in children aged ≤ 15 years with influenza-like illness enrolled in an Influenza and other respiratory viruses’ passive surveillance network in the district of Piura during 2011. Throat swabs and epidemiological data were collected from each participant. Virus isolation was performed by cell culture using four cell lines (LLCMK2, Vero, RD and A549). The identification and serotyping of EV were performed by immunofluorescence assay using monoclonal antibodies. Isolates non-serotypeable by immunofluorescence were selected for analysis by RT-PCR, followed by sequencing. A total of 424 samples were analyzed, and EVs were found in 47 samples (11.1%). 46.8% of these EVs were found in children aged ≤ 1 year. Our results revealed a predominance of EVB species, 62.5%. No EVD isolates were isolated. Fifteen serotypes were identified, 4 EVA, 8 EVB, and 2 EVC species. Moreover, seven samples could not be correctly classified with our methodology. The most common serotypes were coxsackievirus B2, coxsackievirus A2, and echovirus 9. The use of cells RD and A549 increase the isolation of EVs. This study provides data about the serotypes of EVs circulating in the district of Piura and sets the need for further studies.

Keywords: Enterovirus, respiratory infections, Piura