Evaluación del empleo de Antígeno Excretorio-Secretorio (AES) de Toxoplasma gondii en la distinción de la fase aguda y crónica de toxoplasmosis en ratones mediante Western Blot

Abstract

Toxoplasma gondii es un parásito apicomplexo intracelular que afecta al ser humano por diferentes vías de transmisión. Las manifestaciones clínicas se presentan casi exclusivamente en individuos inmunosuprimidos, quienes están expuestos a la reactivación de la enfermedad. El diagnóstico serológico de toxoplasmosis tanto de fase aguda y crónica se interpreta por la presencia/ausencia de los anticuerpos IgM e IgG. Asimismo, los antígenos de excreción-secreción (E/S) se han catalogado como un buen marcador de diagnóstico, por su presencia (90%) en el total de antígenos circulantes y su alta inmunogenicidad. En este estudio se utilizaron antígenos de excreción-secreción (AES) de T. gondii RH cultivados en LLC-MK2 y se enfrentó a sueros de ratones Swiss infectados con T. gondii RH (6; grupo I; 5 dpi), T. gondii Me49 (6; grupo II; 0, 14, 28, 56, 60, 84, 112, 158 y 165 dpi) y un grupo control de ratones no infectados (6, grupo III), mediante la prueba de Western Blot (WB). El objetivo fue determinar un patrón antigénico que permita distinguir las fases aguda y crónica de la toxoplasmosis. Se comprobó el alto grado de crecimiento de ambas cepas mediante microscopía y se cuantificó mediante qPCR, lo cual corroboró la fase aguda y crónica con las cepas RH y Me49, respectivamente. Con el WB, no se detectaron bandas con AES enfrentados a sueros del grupo I; por el contrario, con los sueros dpi del grupo II se obtuvieron bandas antigénicas en el rango de 10-129 kDa. Con los sueros individuales de 60 dpi, se obtuvieron 13 bandas de 10, 14, 17, 19, 22, 25, 27, 30, 37, 45, 57, 65 y 106 kDa, donde las bandas de 30, 37, 45 y 106 kDa se detectaron en todos los sueros. Con los sueros (0165 dpi) del seguimiento serológico se detectaron bandas de 26, 28, 33, 40, 60 y 129 kDa, donde las bandas de 28 y 33 kDa se evidenciaron en todos los sueros 56-165 dpi. En el presente estudio, con los AES no se obtuvo el perfil antigénico que permita distinguir las fases aguda y crónica de la toxoplasmosis. Sin embargo, se halló un perfil antigénico que podría ser útil para identificar la fase crónica y vigilar la evolución clínica de los pacientes con toxoplasmosis.