Aislamiento, cultivo y caracterización de células madre mesenquimales derivadas de pulpa dental de dientes deciduos

Abstract

Las CMMh de pulpa dental decidua son utilizadas en terapias regenerativas por su capacidad de autorrenovación, regeneración, diferenciación, inmunomodulación, promoción del angiogénesis y regeneración de tejidos dañados. Este estudio de enfoque cuantitativo, experimental- aplicativo, prospectivo, longitudinal y analítico, con objetivo de aislar, cultivar y caracterizar CMMh de pulpa dental decidua. Los parámetros evaluados fueron: cinética de crecimiento durante 8 pases: forma y adhesión al plástico valorada mediante microscopía, presencia de marcadores específico positivos CD90, CD73. CD105 y negativos, CD34, CD45, HLA-DR mediante citometría de flujo. Capacidad diferenciadora realizada a través de ensayos de diferenciación hacia adipocito y osteocito. Los resultados obtenidos mostraron que ha sido posible aislar y cultivar CMMh de pulpa dental durante 8 pases, presentando forma fibroblástica característica de CMMh. Encontrando que los cultivos presentan, senescencia replicativa, a partir del pase 6 acrecentándose en los pases; 7 y 8. La cinética de crecimiento, recuento de células viables mostró que las CMMh cultivadas presentaron tiempos de duplicación (entre 51 a 64 h adecuados para este tipo de cultivos) en los pases 2,3,4,5. En los pases 6, 7 y 8 estos tiempos de duplicación se alargan (hasta 131 y 154 h). El crecimiento de línea celular muestra un doblaje poblacional acumulativo, medido en 8 pases, presentando capacidad de diferenciación y expresión de genes. Concluyendo que las SHED se pueden aislar, cultivar y caracterizar in vitro, las SHED demostraron un patrón de proliferación, características inmunofenotípica y capacidad de diferenciación.