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Title: Caracterización de la actividad Enzimática de la B-Galactosidasa aislada de un cultivo líquido de Pleurotus ostreatus a base de suero de leche
Advisor(s): Arellano Barragán, Julio César
Issue Date: 2019
Institution: Universidad Nacional de Trujillo
Abstract: RESUMEN En el presente trabajo se buscó caracterizar la actividad enzimática de la ß-galactosidasa aislada de un cultivo líquido de Pleurotus ostreatus a base de suero de leche. Para ello, muestras de micelio de P. ostreatus fueron sembradas en agar suero de leche e incubadas durante 20-24 días. Fragmentos de 1 cm2 del crecimiento micelial fueron transferidos a medios de cultivo conteniendo caldo suero de leche, dejándose en crecimiento por 21 días. Los cultivos líquidos fueron filtrados para la obtención del extracto crudo, del cual se determinó la actividad enzimática, la concentración de enzima, el efecto del pH, de la temperatura, de enzima, del sustrato orto-nitrofenil-ß-galactopiranósido (ONPG) y del tiempo de incubación; encontrándose que, el extracto crudo de ß-galactosidasa presenta una actividad enzimática de 0,394 U/mL, una concentración de proteínas de 0,8545 mg/mL y una actividad específica de 0,461 U/mg. Los valores de pH y temperatura óptimos de la enzima en estado soluble fueron a pH 3 y a 35°C. Para calcular los valores de Vmax y Km de la ß-galactosidasa, se graficó el modelo cinético de Lineweaver-Burk donde los valores fueron de 0,0262 μmol/min y 16,11 mM, respectivamente. Los resultados revelaron que cuando se efectúa la reacción enzimática (enzima-sustrato), se aprecia el aumento en la concentración del producto hasta que la reacción termina o alcanza su punto de equilibrio a los 30 minutos.
Note: ABSTRACT The aim of the present research was characterize the enzymatic activity of ß-galactosidase isolated from a liquid culture of Pleurotus ostreatus based on whey. For this, samples of mycelium of P. ostreatus were cultivated in agar whey and incubated for 20-24 days. Fragments of 1 cm2 of the mycelial growth were transferred to culture media containing whey broth, leaving in growth for 21 days. The liquid cultures were filtered to obtain the crude extract, from which the enzymatic activity, the concentration of enzyme, the effect of pH, temperature, enzyme, substrate ortho-nitrophenyl-β-galactopyranoside (ONPG) and the incubation time were determined; being found that, the crude extract of ß-galactosidase presents an enzymatic activity of 0.394 U/mL, a protein concentration of 0.8545 mg/mL and a specific activity of 0.461 U/mg. The optimal pH and temperature values of the enzyme in the soluble state were at pH 3 and at 35 °C. To calculate the Vmax and Km values of the β-galactosidase, the Lineweaver-Burk kinetic model was graphed where the values were 0,0262 μmol/min and 16,11 mM, respectively. The results revealed that when the enzymatic reaction (enzyme-substrate) is carried out, the increase in the concentration of the product is observed until the reaction ends or reaches its equilibrium point at 30 minutes.
Discipline: Maestría en Ciencias mención Biotecnología Agroindustrial y Ambiental
Grade or title grantor: Universidad Nacional de Trujillo.Escuela de Posgrado
Grade or title: Maestra en Ciencias
Register date: 28-Feb-2019



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