Aislamiento, caracterización físico-química y evaluación del consumo de sólidos solubles totales de las levaduras del fruto de Sapindus saponaria, de la zona de Cotahuasi - Arequipa

Abstract

Este trabajo tuvo como objetivo el caracterizar físico-químicamente el fruto de Sapindus saponaria y aislar y evaluar el consumo de sólidos solubles totales de las levaduras de dichos frutos, de la localidad de Cotahuasi-Arequipa. Para ampliar los conocimientos sobre la parte microbiológica de S. saponaria. El análisis proximal del fruto de S. saponaria fue realizado en el laboratorio de LABINSERV de la Facultad de Ciencias Naturales y Formales de la Universidad Nacional de San Agustín. Se empleó los métodos de Norma Técnica Peruana (NTP 209) y Association of Analytical Communities (AOAC), obteniendo 5,71% de Humedad, 4,58% de Cenizas, 0,75% de Grasa, 5,73% de Proteínas, 77,5% de Carbohidratos, 5,64% de Fibra y 351,31 Kcal/100 g de Energía. El aislamiento y purificación de las levaduras se llevó a cabo en los medios APD + cloranfenicol y DG-18 a 25°C. Se aislaron 9 cepas de levaduras a las cuales se las caracterizo macro y microscópicamente presentando coloración Rosado coral (55,5%) y blanco (44,4%); forma puntiforme (55,5%) y circular (44,4%); tamaño ≤ 1.0 mm (44,4%) y > 1.0 mm (55.5%); Borde completo (100%); Opacidad opaca (100%); Viscosidad cremosa (100%) y; Elevación convexa (100%) y umbonada (11.1%). Además de presentar una morfología típica ovalada, levaduriforme con puntos germinales. Se realizó la secuenciación molecular de 3 de las cepas, en el instituto de biotecnología del ADN Uchumayo E.I.R.L. empleando el Kit “The MasterPure™ DNA Purification Kit” para la extraccion del ADN y seguidamente se amplió la región ITS por PCR haciendo uso del Kit “The MasterPure™ DNA Purification Kit”. La identificación se realizó con el programa Blast, logrando identificar 3 especies nuevas, pertenecientes a los géneros Candida sp (2 especies) y Rhodotorula sp (1 especie). Se depositará y registrará las secuencias de dichas se pasen el banco genómico GenBank. Así mismo, se realizó pruebas de las 9 cepas aisladas mediante su desarrollo fermentativo anaerobio. Para la vía anaerobia se realizó el consumo de solidos solubles (Brix) de 5 azucares: glucosa, sacarosa, fructuosa, lactosa maltosa. Se sometió a las 9 cepas aisladas, a concentraciones de 50%, 40%,30% y 20% de cada azúcar, donde se observó que no hubo consumo de solidos solubles por parte de las cepas O, R, 2, B y H. Las cepas Q, A, 3 y 1B presentaron disminución de solidos solubles. El mejor consumo de solidos solubles fue en glucosa, disminuyendo de 1,5 a 0,5 Brix a concentraciones de 50%, 40%, 30% y 20%); seguido por sacarosa, disminuyendo 1,5 a 0,5 Brix en concentraciones de 50%, 40% y 30%., en ambos casos la reducción se dio por las cepas Q, A, 3 y 1B. No fue significativo el consumo de solidos solubles en maltosa, disminuyendo 0,5 Brix a concentraciones del 30% y 20% por las cepas Q, 3 y 1B. Las cepas Q y1B fueron las mejores, disminuyendo la mayor cantidad de Brix en los 5 azucares evaluados y en la mayoría de las concentraciones.