Momento de ovulación en el Cuy hembra (Cavia porcellus); precisión de la histología ovárica y citología vaginal

Abstract

La citología e histología vaginal en hembras se utiliza comúnmente en roedores para clasificar las etapas del ciclo estral. Estudios iniciales reportaron una coincidencia entre la ovulación y la infiltración de leucocitos en el frotis vaginal, definiendo así la infiltración como un indicador de ovulación en cuyes (Cavia porcellus). El objetivo de este estudio fue comparar la precisión de las técnicas de histología y citología vaginal en el cuy para predecir la ovulación que será determinada objetivamente por la presencia de un cuerpo lúteo en formación en el ovario. Cuyes hembras (n=36) de 5 a 6 meses de edad fueron sincronizadas con progesterona (0.22 mg/ kg de solución oral de Altrenogest, Regu-Mate Porcina®, Merck) durante 15 días. Las hembras sincronizadas se distribuyeron aleatoriamente en seis grupos a diferentes momentos después de la última dosis de progesterona: 72, 84, 96, 108, 120 y 132 h, para evaluar la apertura vaginal, citología e histología vaginal. Las variables analizadas en citología fueron: porcentaje de células epiteliales parabasal (PB), intermedias (I), superficiales (S) y cornificados (C), así como la presencia de leucocitos (LEU) y la celularidad del frotis (CF). Las variables analizadas en la histología vaginal fueron: presencia de estrato mucificado que cubre la mucosa vaginal (MUC), estrato mucificado seguido de estrato corneo que cubre la mucosa vaginal (MUC-CORN), estrato córneo que cubre la mucosa vaginal (CORN), estrato granuloso que cubre la mucosa vaginal (GRAN), estrato germinativo que cubre la mucosa vaginal (GERM) e infiltración de leucocitos en el epitelio vaginal (LE) y lumen vaginal (LL). Las variables fueron sometidas a análisis estadístico de Receiver Operating Characteristic (ROC) y al área bajo la curva (AUC) para determinar la precisión para predecir la ovulación. Los resultados indican que la ovulación inicio a las 108 h hasta las 132 h post última dosis de progesterona. Adicionalmente las variables GRAN, LE, C tuvieron una precisión de 0.88, 0.84 y 0.83 (ROC-AUC), para predecir la ovulación, respectivamente. Asimismo, el modelo matemático con variables citológicas e histológicas obtenido por regresión logística binaria para predecir la ovulación muestra una predicción correcta del 86.1% y 91.7%, respectivamente y una precisión de 0.93 y 0.97 (ROC-AUC). En conclusión, las variables histológicas y citológicas de la vagina permiten una alta precisión en la predicción de la ovulación de cuyes sincronizadas con progesterona.

Vaginal cytology and histology are commonly used in rodents to classify the stages of the estrous cycle. Initial studies reported a coincidence between ovulation and leukocyte infiltration in the vaginal smear, thus defining infiltration as an indicator of ovulation in guinea pigs. The objective of this study was to study the accuracy of the use of vaginal histology and cytology to predict ovulation in guinea pig which was objectively determined by the presence of a corpus luteum in formation in the ovary. Female guinea pigs (n = 36) from 5 to 6 months of age were estrous synchronized with progesterone (0.22mg / Kg oral solution Altrenogest, Regu-Mate Porcina®, Merck) for 15 days. Synchronized females were randomly distributed into 6 groups of different times after the last dose of Altrenogest: 72 (G1), 84 (G2), 96 (G3), 108 (G4), 120 (G5) and 132h (G6) to evaluate opening, cytology, and vaginal histology. Epithelial cells were classified by cytology into parabasal(PB), intermediate(I), superficial(S), cornified(C), Leukocyte(LEU) and smear cellularity (CF). The histology of the vaginal tissue evaluated and classified into stratum mucified on vaginal mucosa (MUC), mucified stratum followed by stratum corneum on vaginal mucosa (MUCCORN), stratum corneum on vaginal mucosa (CORN), stratum granulosum on vaginal mucosa (GRAN), stratum germinativum on vaginal mucosa (GERM) and leukocyte infiltration of the vaginal epithelium (LE) and vaginal lumen (LL). The variables were analyzed by Receiver operating characteristic (ROC) and Area under the Curve (AUC) to determine the precision of the variable to predict ovulation. The results indicate that ovulation started at 108h to 132 h post last dose of progesterone. Additionally, the variables GRAN, LE, C have an accuracy of 0.88, 0.84 and 0.83 achieved a ROC-AUC respectively to predict ovulation, with p>0.05. Likewise, the mathematical model with cytological and histological variables obtained by binary logistic regression to predict ovulation shows a correct prediction of 86.1% and 91.7%, respectively, and an accuracy of 0.93 and 0.97 (ROC-AUC). In conclusion, the histological and cytological variables of the vagina allow a high precision in the prediction of ovulation in guinea pigs synchronized with progesterone.