Investigação da Carboxipeptidase, Esfingomielinase e Fosfatase Alcalina de Schistosoma mansoni como potenciais antígenos

Abstract

La esquistosomiasis representa un importante problema de salud pública en las regiones tropicales, descuidado por las compañías farmacéuticas. Se seleccionaron tres genes del transcriptoma de S. mansoni para caracterizarse molecularmente y probarse como vacunas. El gen de la carboxipeptidasa mostró altos niveles de transcripción en la etapa de cercaria y una expresión de proteína variable en las etapas dentro del huésped. La proteína recombinante renaturalizada mostró baja actividad. El gen de la esfingomielinasa mostró un alto nivel de transcripción en los huevos, expresándose en todas las etapas excepto en esquistosomulos de 7 días y hembras. El gen de la fosfatasa alcalina mostró una alta transcripción en cercaria, pero la expresión de la proteína solo está elevada en la etapa de esquistosomule. La inmunización de ratones con cada una de las tres proteínas recombinantes expresadas en E. coli no condujo a una reducción en la carga parasitaria después del desafío. Estos resultados demuestran que varias características de un antígeno son necesarias para que sea un buen candidato para la vacuna.

A esquistossomose representa um grande problema de saúde pública em regiões tropicais, negligenciado pelas empresas farmacêuticas. Três genes foram selecionados a partir do transcriptoma do S. mansoni para serem caracterizados molecularmente e testados como vacinas. O gene da Carboxipeptidase apresentou altos níveis de transcrição no estágio de cercária e uma variável expressão protéica nos estágios intra-hospedeiros. A proteína recombinante renaturada apresentou baixa atividade. O gene da Esfingomielinase apresentou alto nível transcricional em ovos, sendo expresso em todos os estágios exceto em esquistossômulos de 7 dias e fêmeas. O gene da Fosfatase Alcalina apresentou elevada transcrição em cercária, mas a expressão da proteína se eleva somente no estágio de esquistossômulo. A imunização de camundongos com cada uma das três proteínas recombinantes expressas em E. coli não levou à redução da carga parasitária após desafio. Estes resultados demonstram que diversas características de um antígeno são necessárias para que este seja um bom candidato vacinal.

Schistosomiasis is a major public health problem in tropical areas and neglected by most of the pharmaceutical companies. Three genes were selected from S. mansoni transcriptome to be molecularly characterized and tested as vaccines. The Carboxypeptidase gene showed high transcription levels in cercariae stage and a variable protein expression in intra-host stages. The refolded recombinant protein showed limited activity. The Sphingomyelinase gene showed the highest level of transcriptional activity in the egg stage and the protein is expressed in all stages but 7-day old schistosomula and females. The Alkaline Phosphatase gene showed a high transcriptional activity in cercariae stage with most of the mRNA being translated into protein as soon as it penetrates its definitive host. Immunization of mice with each of the three proteins did not show reduction in worm burden recovery after challenge. These results demonstrate that several characteristics of an antigen are important for it to be considered a good vaccine candidate.