Caracterización de los péptidos del veneno del escorpión Hadruroides charcasus con efecto antibacteriano contra Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa

Abstract

RESUMEN El objetivo de la presente investigación fue determinar la caracterización de los péptidos del veneno del escorpión Hadruroides charcasus con efecto antibacteriano frente a Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa. Las proteínas del veneno del escorpión H. charcasus fue cuantificado por el método de relación de absorbancias [mg/mL]= (1,56 x Abs 280nm) (0,76 x Abs 260nm). Para la separación se emplearon 15,46 mg de las proteínas, primero una cromatografía de filtración Sephadex G-75 y luego una cromatografía de intercambio iónico CM Sephadex C-25, después se realizó un perfil de las proteínas mediante HPLC en fase reversa, con una columna analítica Chromolith RP-18e, luego electroforesis en condiciones desnaturalizantes (PAGE-SDS), usando gel al 15,0 % de entrecruzamiento. Para evaluar el efecto antibacteriano se empleó el método de microdilución y el método Kirby-Bauer con cepas de S. aureus ATCC 29213 y P. aeruginosa ATCC 27853. Los resultados demostraron mediante la cromatografía de filtración 5 picos agrupadas en 5 fracciones (F-I a F-V) y de la cromatografía de intercambio iónico 9 picos principales de proteína, agrupados en 7 fracciones (OP4R-1 a OP4R-7) con péptidos de naturaleza catiónica con rangos de peso de 4 KDa, 5,5 KDa, 6,4 KDa y 7,5 KDa. Del HPLC se mostraron 50 señales o picos eluidos del retentato del Amicon con tamaño de exclusión 10 KDa, 54 picos eluidos del retentato y 45 picos eluidos del difusato del Amicon con tamaño de exclusión de 3 KDa. El efecto antibacteriano, la fracción IV presentó una CMI de 3,6 mg/mL para la cepa S. aureus y P. aeruginosa no presentó CMI a las concentraciones evaluadas. A través del método Kirby-Bauer la fracción OP4R-5 a una concentración de 1 μg/μL mostró un halo de inhibición de 9,3 mm para S. aureus y 9,2 mm para P. aeruginosa. Se llegó a la conclusión que el veneno del escorpión H. charcasus presentó péptidos de naturaleza catiónica con efecto antibacteriano frente a S. aureus y P. aeruginosa.