Evaluaci?n de los niveles de los productos g?nicos (ARNm y prote?nas) de genes implicados en el transporte de los ARNm tras el silenciamiento de la prote?na WRN en c?lulas hela

Abstract

El prop?sito de la presente investigaci?n fue evaluar la existencia de un v?nculo funcional entre WRN y componentes de la maquinaria de transporte de los ARNm, que pudiera explicar la alteraci?n en la distribuci?n espacial de los ARNm tras el silenciamiento g?nico de WRN observada en estudios previos. Esto se logr? analizando los niveles de productos g?nicos (ARNm y prote?na) de componentes de la maquinaria de transporte de los ARNm (NXF1, CRM1, GANP, CBP80, UAP56, Aly/REF, eIF4E, THOC1, THOC2) tras el silenciamiento g?nico de WRN con un sistema lentiviral inducido con doxiciclina en c?lulas HeLa, mediante ensayos de RT-qPCR y Western Blot. Los resultados indicaron que, tras depleci?n de WRN, los niveles de transcritos en la mayor?a de genes analizados tienen una variaci?n significativa, los cuales no corresponden con sus niveles de expresi?n proteicos. As? mismo, se comprob? que WRN es capaz de unirse a un componente clave de la maquinaria de transporte de los ARN mensajeros, espec?ficamente a NXF1, tal como se demostr? mediante el ensayo cualitativo de Co-inmunoprecipitaci?n, comprobando que hay un v?nculo funcional entre WRN y la maquinaria de transporte de los ARNm.