Genotipificación de plasmodium vivax de pacientes con malaria, de bellavista, sullana, Perú, usando el gen msp3a
Llanos Quevedo, Jose
2010
Universidad Nacional de Trujillo
Murga Gutiérrez SN. Genotipificación de Plasmodium vivax de pacientes con malaria, de Bellavista, Sullana, Perú, usando el gen MSP3α (tesis doctoral). Trujillo: Universidad Nacional de Trujillo; 2010. El objetivo del estudio fue genotipificar los aislamientos de Plasmodium vivax de pacientes con malaria, del distrito Bellavista, Sullana, Perú, usando el gen de la proteína-3 de la superficie del merozoíto (MSP3), y las técnicas de reacción en cadena de la polimerasa y de polimorfismo de la longitud de los fragmentos de restricción (PCR-RFLP). Se trabajó con 57 muestras de sangre, obtenidas entre julio de 2009 y enero de 2010, de pacientes con malaria por P. vivax, diagnosticada por examen de gota gruesa; de las cuales también se determinaron la densidad parasitaria y el hematocrito indicador de anemia. Este diagnóstico fue confirmado por nested PCR, y en el 96,5% (55/57) de ellas se reconfirmó la especie, no encontrando paciente alguno con P. falciparum. Con estas muestras reconfirmadas para P. vivax se inició la genotipificación, aunque sólo en el 96,4% (53/55) amplificó el fragmento de MSP3 y se analizó por PCR-RFLP usando las enzimas Hha I y Alu I para obtener los patrones de restricción. Se encontró que los fragmentos amplificados del gen MSP3α de P. vivax en el 100% (53/53) mostraron tamaños de 1500 pb. Las digestiones con Hha I y Alu I produjeron cada una un solo patrón, y los tamaños de las bandas producidas fueron similares en todas las muestras. El 49,1% (26/53) de los pacientes presentó una densidad parasitaria alta (1 485 a 20 225 parásitos por µl de sangre) y anemia; ambas en el 53,8% (14/26) de ellos. Se concluye que entre los pacientes con malaria por P. vivax, del distrito Bellavista, está circulando un solo genotipo según el gen MSP3, y está asociado con una alta densidad parasitaria y anemia.
Murga Gutiérrez SN. Genotyping of Plasmodium vivax from patients with malaria, in Bellavista, Sullana, Peru, using the MSP3α gene (doctoral thesis). Trujillo: Universidad Nacional de Trujillo; 2010. The aim of the study was to genotype isolates of P. vivax from patients with malaria, in the Bellavista District, Sullana, Peru, using the gene encoding the merozoite surface protein-3 (MSP3α), and a combined polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) protocol. Fifty seven blood samples were obtained between July 2009 and January 2010, from patients with malaria caused by P. vivax diagnosed by thick smear examination, which also identified the parasite density and hematocrit indicator of anemia. This diagnosis was confirmed by nested PCR, and in 96.5% (55/57) of them the species was reconfirmed. Not one patient was found with P. falciparum. With these reconfirmed P. vivax samples the genotyping was begun, although only in 96.4% (53/55) was the fragment of MSP3 amplified and analyzed by PCR-RFLP using the enzymes Hha I and Alu I to obtain restriction patterns. It was found that amplified fragments of MSP3α gene in 100% (53/53) showed sizes of 1500 bp. Digestion with Hha I and Alu I each yielded a single pattern, and band sizes were similar in all samples. In 49.1% (26/53) of patients a high parasite density (1,485 to 20,225 parasites per µl of blood) and anemia were found, both in 53.8% (14/26) of them. It is concluded that among patients with P. vivax malaria from Bellavista District a single genotype of MSP3 gene is circulating, and it is associated with a high parasite density and anemia.



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