Genotipia de Plasmodium vivax y su importancia en el manejo y control de la malaria de la amazonía peruana
Coha Gonzales, Juana María
2006
Universidad Nacional Mayor de San Marcos
Los genotipos de Plasmodium vivax, junto con la densidad parasitaria pueden estar relacionados al grado de severidad de la malaria. El conocimiento de esta relación puede ayudar a un mejor manejo de la enfermedad, tratamiento con drogas y elaboración de posibles vacunas. El objetivo del trabajo fue determinar el número de genotipos de Plasmodium vivax presentes en la Amazonía Peruana. Para la genotipificación se usó el gen que codifica la proteína de superficie del merozoito (MSP3 alfa) y el polimorfismo generado por secuencias repetitivas de nucleótidos (TR) encontrado en un segmento de 100 Kilobases (Kb) de Plamodium vivax “sinténico” al cromosoma 3 de Plasmodium falciparum. Se trabajó con 302 muestras de sangre de pacientes, a todas ellas se les realizó el examen de la gota gruesa y frotis para el diagnóstico y conocimiento de la densidad parasitaria, dicho diagnóstico fue confirmado por Nested PCR. A las muestras confirmadas se les realizó la genotipificación. Con el marcador MSP3 alfa se identificaron 9 genotipos, de los cuales uno de ellos se encontró asociado a severidad de la enfermedad (P7) (P<0.05, OR>1), y otro relacionado con infecciones mixtas (P9), 1/9 (11%). Para los TR se seleccionaron 9 pares de “primers” de un total de 33. Encontrándose 102 genotipos diferentes de los cuales 24/102 (24%) fueron infecciones por genotipos mixtos. El hecho que exista una inserción en el tamaño de su ADN originalmente reportado, aumenta la posibilidad que se dé la enfermedad en forma más severa. Estos resultados indicarían que poblaciones de Plasmodium vivax son altamente diversos y que infecciones por múltiples clonas se darían en la región hipoendémica de la Amazonía Peruana, las cuales podrían representar un desafío para evaluación posterior de drogas y vacunas.
Tesis
Genotypes of Plasmodium vivax along with parasite density may be associated with the severity level of malaria, and knowledge of this relation can help to better understand the disease, drug treatments and the development of new vaccines. The object of this project was to determine the number of Plasmodium vivax genotypes present in the Peruvian Amazon. This genotyping utilized the gene encoding a merozoite surface protein (MSP3 alpha) and the polymorphism generated by a sequence of nucleotide repeats (TR) found in a 100 kilobases (Kb) de Plasmodium vivax syntenic chromosome 3 of Plasmodium falciparum. In this project we used 302 blood samples from patients. A blood droplet and droplet smear were obtained for the diagnostic and observation of parasite density; these results were later confirmed through Nested PCR. All samples were submitted for genotyping. Using the marker MSP3 alpha, 9 genotypes were identified, one was found associated with disease severity (P7) (P<0.05, OR>1) and other with mixed infections (P9) 1/9 (11%). For the TR, 9 pairs of primers were selected from a pool of 33 describing 102 different genotypes of which 24 (24 %) were mixed infections. Observation supported by the existence of a DNA insertion that increases the original size of the sequence, increasing the possibility that the disease become more severe. These results would indicate that populations of Plasmodium vivax are highly diverse and can result in multiple infections by different clones in hypoendemic regions such as the Peruvian Amazon, making later evaluation of drugs and vaccines more challenging.



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